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番木瓜环斑病毒CP基因dsRNA原核表达载体的快速构建

陈瑶, 沈文涛, 言普, 黎小瑛, 周鹏

文章导航 > 热带生物学报（中英文） > 2011 > 2(2): 113-116

陈瑶, 沈文涛, 言普, 黎小瑛, 周鹏. 番木瓜环斑病毒CP基因dsRNA原核表达载体的快速构建[J]. 热带生物学报（中英文）, 2011, 2(2): 113-116. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2011.02.006

引用本文:

陈瑶, 沈文涛, 言普, 黎小瑛, 周鹏. 番木瓜环斑病毒CP基因dsRNA原核表达载体的快速构建[J]. 热带生物学报（中英文）, 2011, 2(2): 113-116. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2011.02.006

CHEN Yao, SHEN Wentao, YAN Pu, LI Xiaoying, ZHOU Peng. Fast Construction of dsRNA Prokaryotic Expression Vector of Papaya Ringspot Virus CP Gene[J]. Journal of Tropical Biology, 2011, 2(2): 113-116. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2011.02.006

Citation:

CHEN Yao, SHEN Wentao, YAN Pu, LI Xiaoying, ZHOU Peng. Fast Construction of dsRNA Prokaryotic Expression Vector of Papaya Ringspot Virus CP Gene[J]. Journal of Tropical Biology, 2011, 2(2): 113-116. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2011.02.006

番木瓜环斑病毒CP基因dsRNA原核表达载体的快速构建

DOI: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2011.02.006

陈瑶^1,2,
沈文涛²,
言普²,
黎小瑛²,
周鹏^1,2, ,

1. 海南大学农学院, 海南儋州 571737;
2. 中国热带农业科学院热带生物技术研究所/分析测试中心, 海南海口 571101

基金项目:

三亚市重点科技计划项目(080112)

国家科技支撑计划课题(2009BADA2B02-04)

中央级公益性科研院所基本科研业务费(ITBB110211)

国家自然科学基金(30760134,31000844)

第一作者:
陈瑶(1986-),女,重庆大足人,海南大学农学院2009级硕士研究生.

通信作者:
周鹏(1963-),男,安徽人,研究员,博士生导师,E-mail:zhp6301@126.com

中图分类号: Q78;S667.903.6

Fast Construction of dsRNA Prokaryotic Expression Vector of Papaya Ringspot Virus CP Gene

CHEN Yao^1,2,
SHEN Wentao²,
YAN Pu²,
LI Xiaoying²,
ZHOU Peng^{1,2
, ,}

1. College of Agriculture, Hainan University, Haikou 570228, China;
2. Key Biotechnology Laboratory for Tropical Crops, Ministry of Agriculture, Institute of Tropical Bioscience and Biotechnology, Analysis & testing center, CATAS, Haikou 571101, China

摘要: 重点介绍了一种快速构建dsRNA原核表达载体的方法。以番木瓜环斑病毒外壳蛋白基因(PRSV-CP)3'端-279 bp保守区段为基础,通过OZ-LIC法构建861 bp,432 bp和279 bp 3种不同长度的发卡结构,再通过XhoⅠ和ClaⅠ双酶切,将其连接到pSP73原核表达载体上,构建成PRSV-CP基因dsRNA原核表达载体。
- 番木瓜环斑病毒外壳蛋白基因 /
- dsRNA /
- RNA沉默 /
- OZ-LIC法 /
- 原核表达载体
Abstract: In the paper,a method for constructing dsRNA prokaryotic expression vector was introduced.The conserved region of PRSV-CP gene,which is 278 bp of 3'-end region,was used as the base,three hairpin structures of different lengths（861 bp,432 bp,279 bp） were cloned and constructed through one-step,zero-background ligation-independent cloning（OZ-LIC） method,and which were successively cloned into pSP73 prokaryotic expression vector after being digested with XhoⅠand ClaⅠ.Finally three recombinants of dsRNA prokaryotic expression plasmid of PRSV-CP gene were obtained.
- PRSV-CP /
- dsRNA /
- RNA silencing /
- OZ-LIC method /
- prokaryotic expression vector

[1]	郑伊蒙, 段家文, 张艺, 李晨辉, 谢珍玉, 黄爱优. 三角褐指藻乳酸脱氢酶的原核表达及纯化鉴定 . 热带生物学报（中英文）, 2026, 17(1): 136-143. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.20240176
[2]	丁家辉, 张倩玉, 袁红梅. 橡胶草TkBZR家族基因的鉴定与原核表达分析 . 热带生物学报（中英文）, 2026, 17(3): 379-389. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.20250029
[3]	刘梓权, 朱家红, 王颖, 李辉亮, 李玉姬, 唐燕琼, 郭冬. 橡胶树HbbZIP74基因的表达分析及蛋白原核表达纯化 . 热带生物学报（中英文）, 2026, 17(3): 399-409. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.20250015
[4]	唐璐芝, 吴竞远, 陈元来, 朱彬彬, 赵惠萍. 木薯RXam2的原核蛋白表达及抗病功能分析 . 热带生物学报（中英文）, 2025, 16(4): 561-569. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.20240147
[5]	徐杨玉, 刘付香, 洪彦彬, 陈小平, 李海芬, 温世杰, 李杏瑜, 李玲, 梁炫强. 绿色木霉碱性蛋白酶基因TvALP的克隆与原核表达 . 热带生物学报（中英文）, 2024, 15(6): 683-690. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.20240077
[6]	金柳, 李萌晗, 郑育声, 李东栋. 油棕乙酰基酰基载体蛋白硫酯酶EgFATA基因的克隆与功能分析 . 热带生物学报（中英文）, 2023, 14(4): 357-363. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2023.04.002
[7]	张伊动, 马香, 李宏, 唐鸿倩, 刘柱, 唐燕琼. 维氏气单胞菌Cbl蛋白的原核表达及纯化 . 热带生物学报（中英文）, 2021, 12(3): 333-339. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2021.03.009
[8]	曹欣, 唐燕琼, 李宏, 马香, 刘柱. Flag-ALD融合载体构建及蛋白表达 . 热带生物学报（中英文）, 2020, 11(2): 132-137, 155. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2020.02.002
[9]	张转丹, 肖正泮, 武新丽, 孙艳, 罗应, 吴昊, 韦双双, 裴业春, 王大勇. 鱼类神经坏死病毒衣壳蛋白MCP和鮰爱德华氏菌外膜蛋白ompN1融合基因的原核表达 . 热带生物学报（中英文）, 2020, 11(2): 145-155. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2020.02.004
[10]	熊越, 沈文涛, 庹德财, 黎小瑛, 言普, 周鹏. 番木瓜eIF4E家族蛋白的亚细胞定位 . 热带生物学报（中英文）, 2017, 8(4): 415-418. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2017.04.007
[11]	耿晓姗, 刘秦, 党会杰, 武军政, 罗丽娟. 利用毒素蛋白基因ccdB构建高效低背景T-载体 . 热带生物学报（中英文）, 2016, 7(2): 232-236. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2016.02.016
[12]	黄超, 张丽丽, 邓柳红, 张春发. 海南五指山美洲商陆抗病毒蛋白PAP-Ⅰ基因的原核表达及活性验证 . 热带生物学报（中英文）, 2016, 7(1): 82-88. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2016.01.014
[13]	曹玉鑫, 花龙, 赵天龙, 李明容, 夏志辉. Xa21全生育期表达载体的构建 . 热带生物学报（中英文）, 2013, 4(2): 133-137,145. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2013.02.001
[14]	訾亮, 洪灏, 翟金玲, 马穗, 黄惜. 拟南芥NiNJA基因酵母双杂诱饵载体构建及互作蛋白的筛选 . 热带生物学报（中英文）, 2013, 4(1): 31-35. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2013.01.002
[15]	张东东, 言普, 沈文涛, 黎小瑛, 周鹏. 番木瓜eIF4E突变基因的构建 . 热带生物学报（中英文）, 2012, 3(2): 126-129,134. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2012.02.014
[16]	刘伟, 翟金玲, 许慧敏, 黄惜. 橡胶HbJAZ1基因的原核表达与纯化分析 . 热带生物学报（中英文）, 2011, 2(2): 117-122. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2011.02.016
[17]	彭军, 黄俊生. 植物内源小RNA及其介导的基因沉默途径 . 热带生物学报（中英文）, 2011, 2(2): 187-192. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2011.02.002
[18]	李泽友, 沈文涛, 言普, 李亚丽, 周鹏. 番木瓜CYP79A2基因片段的克隆与序列分析 . 热带生物学报（中英文）, 2010, 1(1): 55-58. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2010.01.015
[19]	林生, 潘大仁, 周以飞, 陈观水, 张绪璋, 吴子峰. 果蔗SoSgt1基因的克隆表达与植物反义表达载体的构建 . 热带生物学报（中英文）, 2010, 1(1): 1-7. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2010.01.010
[20]	吴金燕, 言普, 沈文涛, 周鹏. 番木瓜eIF4E和eIFiso4E酵母双杂交诱饵表达载体的构建及自激活检测 . 热带生物学报（中英文）, 2010, 1(1): 50-54. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2010.01.014

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番木瓜环斑病毒CP基因dsRNA原核表达载体的快速构建

DOI: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2011.02.006

1. 海南大学农学院, 海南儋州 571737;

2. 中国热带农业科学院热带生物技术研究所/分析测试中心, 海南海口 571101

基金项目:

三亚市重点科技计划项目(080112)

国家科技支撑计划课题(2009BADA2B02-04)

中央级公益性科研院所基本科研业务费(ITBB110211)

国家自然科学基金(30760134,31000844)

作者简介:
陈瑶(1986-),女,重庆大足人,海南大学农学院2009级硕士研究生.

通讯作者: 周鹏(1963-),男,安徽人,研究员,博士生导师,E-mail:zhp6301@126.com

收稿日期: 2011-06-27

中图分类号: Q78;S667.903.6

关键词:

番木瓜环斑病毒外壳蛋白基因 /

原核表达载体

摘要: 重点介绍了一种快速构建dsRNA原核表达载体的方法。以番木瓜环斑病毒外壳蛋白基因(PRSV-CP)3'端-279 bp保守区段为基础,通过OZ-LIC法构建861 bp,432 bp和279 bp 3种不同长度的发卡结构,再通过XhoⅠ和ClaⅠ双酶切,将其连接到pSP73原核表达载体上,构建成PRSV-CP基因dsRNA原核表达载体。

English Abstract

陈瑶, 沈文涛, 言普, 黎小瑛, 周鹏. 番木瓜环斑病毒CP基因dsRNA原核表达载体的快速构建[J]. 热带生物学报（中英文）, 2011, 2(2): 113-116. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2011.02.006

引用本文:

陈瑶, 沈文涛, 言普, 黎小瑛, 周鹏. 番木瓜环斑病毒CP基因dsRNA原核表达载体的快速构建[J]. 热带生物学报（中英文）, 2011, 2(2): 113-116. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2011.02.006

CHEN Yao, SHEN Wentao, YAN Pu, LI Xiaoying, ZHOU Peng. Fast Construction of dsRNA Prokaryotic Expression Vector of Papaya Ringspot Virus CP Gene[J]. Journal of Tropical Biology, 2011, 2(2): 113-116. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2011.02.006

Citation:

CHEN Yao, SHEN Wentao, YAN Pu, LI Xiaoying, ZHOU Peng. Fast Construction of dsRNA Prokaryotic Expression Vector of Papaya Ringspot Virus CP Gene[J]. Journal of Tropical Biology, 2011, 2(2): 113-116. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2011.02.006

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