番木瓜环斑病毒CP基因dsRNA原核表达载体的快速构建

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番木瓜环斑病毒CP基因dsRNA原核表达载体的快速构建

陈瑶, 沈文涛, 言普, 黎小瑛, 周鹏

文章导航 > 热带生物学报 > 2011 > 2(2): 113-116

陈瑶, 沈文涛, 言普, 黎小瑛, 周鹏. 番木瓜环斑病毒CP基因dsRNA原核表达载体的快速构建[J]. 热带生物学报, 2011, 2(2): 113-116. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2011.02.006

引用本文:

陈瑶, 沈文涛, 言普, 黎小瑛, 周鹏. 番木瓜环斑病毒CP基因dsRNA原核表达载体的快速构建[J]. 热带生物学报, 2011, 2(2): 113-116. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2011.02.006

CHEN Yao, SHEN Wentao, YAN Pu, LI Xiaoying, ZHOU Peng. Fast Construction of dsRNA Prokaryotic Expression Vector of Papaya Ringspot Virus CP Gene[J]. Journal of Tropical Biology, 2011, 2(2): 113-116. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2011.02.006

Citation:

CHEN Yao, SHEN Wentao, YAN Pu, LI Xiaoying, ZHOU Peng. Fast Construction of dsRNA Prokaryotic Expression Vector of Papaya Ringspot Virus CP Gene[J]. Journal of Tropical Biology, 2011, 2(2): 113-116. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2011.02.006

番木瓜环斑病毒CP基因dsRNA原核表达载体的快速构建

doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2011.02.006

陈瑶^1,2,
沈文涛²,
言普²,
黎小瑛²,
周鹏^1,2, ,

1. 海南大学农学院, 海南儋州 571737;
2. 中国热带农业科学院热带生物技术研究所/分析测试中心, 海南海口 571101

基金项目:

国家科技支撑计划课题(2009BADA2B02-04)

中央级公益性科研院所基本科研业务费(ITBB110211)

国家自然科学基金(30760134,31000844)

三亚市重点科技计划项目(080112)

第一作者:
陈瑶(1986-),女,重庆大足人,海南大学农学院2009级硕士研究生.

通信作者:
周鹏(1963-),男,安徽人,研究员,博士生导师,E-mail:zhp6301@126.com

中图分类号: Q78;S667.903.6

Fast Construction of dsRNA Prokaryotic Expression Vector of Papaya Ringspot Virus CP Gene

CHEN Yao^1,2,
SHEN Wentao²,
YAN Pu²,
LI Xiaoying²,
ZHOU Peng^{1,2
, ,}

1. College of Agriculture, Hainan University, Haikou 570228, China;
2. Key Biotechnology Laboratory for Tropical Crops, Ministry of Agriculture, Institute of Tropical Bioscience and Biotechnology, Analysis & testing center, CATAS, Haikou 571101, China

摘要: 重点介绍了一种快速构建dsRNA原核表达载体的方法。以番木瓜环斑病毒外壳蛋白基因(PRSV-CP)3'端-279 bp保守区段为基础,通过OZ-LIC法构建861 bp,432 bp和279 bp 3种不同长度的发卡结构,再通过XhoⅠ和ClaⅠ双酶切,将其连接到pSP73原核表达载体上,构建成PRSV-CP基因dsRNA原核表达载体。
- 番木瓜环斑病毒外壳蛋白基因 /
- dsRNA /
- RNA沉默 /
- OZ-LIC法 /
- 原核表达载体
Abstract: In the paper,a method for constructing dsRNA prokaryotic expression vector was introduced.The conserved region of PRSV-CP gene,which is 278 bp of 3'-end region,was used as the base,three hairpin structures of different lengths（861 bp,432 bp,279 bp） were cloned and constructed through one-step,zero-background ligation-independent cloning（OZ-LIC） method,and which were successively cloned into pSP73 prokaryotic expression vector after being digested with XhoⅠand ClaⅠ.Finally three recombinants of dsRNA prokaryotic expression plasmid of PRSV-CP gene were obtained.
- PRSV-CP /
- dsRNA /
- RNA silencing /
- OZ-LIC method /
- prokaryotic expression vector

[1]	杨泽昊, 胡佳艺, 赵源杰, 刘萌萌, 陈宇. 慢病毒介导的猫四连接素蛋白过表达系统的构建 . 热带生物学报, 2025, 16(1): 58-63. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.20240155
[2]	郑伊蒙, 段家文, 张艺, 李晨辉, 谢珍玉, 黄爱优. 三角褐指藻乳酸脱氢酶的原核表达及纯化鉴定 . 热带生物学报, 2025, 16(): 1-8. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.20240176
[3]	唐璐芝, 吴竞远, 陈元来, 朱彬彬, 赵惠萍. 木薯RXam2的原核蛋白表达及抗病功能分析 . 热带生物学报, 2025, 16(): 1-9. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.20240147
[4]	丁家辉, 张倩玉, 袁红梅. 橡胶草TkBZR家族基因的鉴定与原核表达分析 . 热带生物学报, 2025, 16(): 1-11. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.20250029
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[13]	耿晓姗, 刘秦, 党会杰, 武军政, 罗丽娟. 利用毒素蛋白基因ccdB构建高效低背景T-载体 . 热带生物学报, 2016, 7(2): 232-236. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2016.02.016
[14]	黄超, 张丽丽, 邓柳红, 张春发. 海南五指山美洲商陆抗病毒蛋白PAP-Ⅰ基因的原核表达及活性验证 . 热带生物学报, 2016, 7(1): 82-88. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2016.01.014
[15]	洪灏, 刘小婷, 肖华, 黄惜, 袁红梅. HbCoi1基因启动子酵母单杂pHIS载体的构建及互作蛋白筛选 . 热带生物学报, 2015, 6(3): 256-260. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2015.03.006
[16]	曹玉鑫, 花龙, 赵天龙, 李明容, 夏志辉. Xa21全生育期表达载体的构建 . 热带生物学报, 2013, 4(2): 133-137,145. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2013.02.001
[17]	訾亮, 洪灏, 翟金玲, 马穗, 黄惜. 拟南芥NiNJA基因酵母双杂诱饵载体构建及互作蛋白的筛选 . 热带生物学报, 2013, 4(1): 31-35. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2013.01.002
[18]	张东东, 言普, 沈文涛, 黎小瑛, 周鹏. 番木瓜eIF4E突变基因的构建 . 热带生物学报, 2012, 3(2): 126-129,134. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2012.02.014
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[20]	彭军, 黄俊生. 植物内源小RNA及其介导的基因沉默途径 . 热带生物学报, 2011, 2(2): 187-192. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2011.02.002

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番木瓜环斑病毒CP基因dsRNA原核表达载体的快速构建

doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2011.02.006

1. 海南大学农学院, 海南儋州 571737;

2. 中国热带农业科学院热带生物技术研究所/分析测试中心, 海南海口 571101

基金项目:

国家科技支撑计划课题(2009BADA2B02-04)

中央级公益性科研院所基本科研业务费(ITBB110211)

国家自然科学基金(30760134,31000844)

三亚市重点科技计划项目(080112)

作者简介:
陈瑶(1986-),女,重庆大足人,海南大学农学院2009级硕士研究生.

通讯作者: 周鹏(1963-),男,安徽人,研究员,博士生导师,E-mail:zhp6301@126.com

收稿日期: 2011-06-27

中图分类号: Q78;S667.903.6

关键词:

番木瓜环斑病毒外壳蛋白基因 /

原核表达载体

摘要: 重点介绍了一种快速构建dsRNA原核表达载体的方法。以番木瓜环斑病毒外壳蛋白基因(PRSV-CP)3'端-279 bp保守区段为基础,通过OZ-LIC法构建861 bp,432 bp和279 bp 3种不同长度的发卡结构,再通过XhoⅠ和ClaⅠ双酶切,将其连接到pSP73原核表达载体上,构建成PRSV-CP基因dsRNA原核表达载体。

English Abstract

陈瑶, 沈文涛, 言普, 黎小瑛, 周鹏. 番木瓜环斑病毒CP基因dsRNA原核表达载体的快速构建[J]. 热带生物学报, 2011, 2(2): 113-116. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2011.02.006

引用本文:

陈瑶, 沈文涛, 言普, 黎小瑛, 周鹏. 番木瓜环斑病毒CP基因dsRNA原核表达载体的快速构建[J]. 热带生物学报, 2011, 2(2): 113-116. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2011.02.006

CHEN Yao, SHEN Wentao, YAN Pu, LI Xiaoying, ZHOU Peng. Fast Construction of dsRNA Prokaryotic Expression Vector of Papaya Ringspot Virus CP Gene[J]. Journal of Tropical Biology, 2011, 2(2): 113-116. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2011.02.006

Citation:

CHEN Yao, SHEN Wentao, YAN Pu, LI Xiaoying, ZHOU Peng. Fast Construction of dsRNA Prokaryotic Expression Vector of Papaya Ringspot Virus CP Gene[J]. Journal of Tropical Biology, 2011, 2(2): 113-116. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2011.02.006

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