拟南芥<i>NiNJA</i>基因酵母双杂诱饵载体构建及互作蛋白的筛选

訾亮; 洪灏; 翟金玲; 马穗; 黄惜

doi:10.15886/j.cnki.rdswxb.2013.01.002

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拟南芥NiNJA基因酵母双杂诱饵载体构建及互作蛋白的筛选

訾亮, 洪灏, 翟金玲, 马穗, 黄惜

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訾亮, 洪灏, 翟金玲, 马穗, 黄惜. 拟南芥NiNJA基因酵母双杂诱饵载体构建及互作蛋白的筛选[J]. 热带生物学报（中英文）, 2013, 4(1): 31-35. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2013.01.002

引用本文:

訾亮, 洪灏, 翟金玲, 马穗, 黄惜. 拟南芥NiNJA基因酵母双杂诱饵载体构建及互作蛋白的筛选[J]. 热带生物学报（中英文）, 2013, 4(1): 31-35. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2013.01.002

ZI Liang, HONG Hao, ZHAI Jinling, MA Sui, HUANG Xi. Construction of Bait Vector for NiNJA Gene in Arabidopsis and Screening the Interacted Proteins Using Yeast Two-hybrid[J]. Journal of Tropical Biology, 2013, 4(1): 31-35. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2013.01.002

Citation:

ZI Liang, HONG Hao, ZHAI Jinling, MA Sui, HUANG Xi. Construction of Bait Vector for NiNJA Gene in Arabidopsis and Screening the Interacted Proteins Using Yeast Two-hybrid[J]. Journal of Tropical Biology, 2013, 4(1): 31-35. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2013.01.002

拟南芥NiNJA基因酵母双杂诱饵载体构建及互作蛋白的筛选

DOI: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2013.01.002

訾亮^1,2,
洪灏^1,2,
翟金玲^1,2,
马穗^1,2,
黄惜^1,2, ,

热带生物资源教育部重点实验室/生物科学技术研究所; 海南大学农学院, 海南海口 570228

基金项目:

教育部高等学校博士学科点专项科研基金博导类项目(20114601110003)

国家自然科学基金项目(31060107)

详细信息

第一作者:
訾亮(1987－)，男，山东泰安人，海南大学农学院2010级硕士研究生．

通信作者:
黄惜，教授，xihuang@hainu.edu.cn

中图分类号: Q782

Construction of Bait Vector for NiNJA Gene in Arabidopsis and Screening the Interacted Proteins Using Yeast Two-hybrid

ZI Liang^1,2,
HONG Hao^1,2,
ZHAI Jinling^1,2,
MA Sui^1,2,
HUANG Xi^{1,2
, ,}

1. Key Laboratory of Tropic Biological Resources of Ministry of Education/Institute of Bio-Science and Technology, College of Agromy, Hainan University, Haikou 570228, China

摘要: JAZ蛋白是植物茉莉酸信号途径的重要负调控因子,JAZ与NiNJA形成蛋白复合体抑制茉莉酸下游转录因子的转录活性,NiNJA蛋白是联系JAZ蛋白与下游转录因子的重要因子。为了研究NiNJA调控的下游基因,首先构建了NiNJA基因的诱饵载体pGBKT7-NiNJA,然后转化酵母Y2HGold感受态,通过自转录激活实验,发现诱饵载体pGBKT7-`没有自转录激活活性。在此基础上,从拟南芥"Mate & Plate^TM"Library进行酵母双杂筛选,获得若干个与NiNJA互作的蛋白,为下一步鉴定NiNJA的互作蛋白及茉莉酸的信号调控途径打下基础。
- NiNJA基因 /
- pGBKT7诱饵载体 /
- 自转录激活验证 /
- 酵母双杂
Abstract: JAZ proteins are important negative factors for jasmonic acid （ JA） signaling pathways in Arabidopsis thaliana. NiNJA interacted with JAZ proteins to inhibit the transcription activity of JA-related transcription factors. NiNJA is a key factor that connected the JAZs and JA-related transcription factors. In order to screen NiNJA interacted proteins,NiNJA full-length cDNA sequence was PCR amplified inserted into pGBKT7 vector to construct a bait vector for yeast two-hybrid system. Furthermore,the vector was transformed into Y2H Gold strain. The result of autoactivation showed that pGBKT7-NiNJA vector had no autoactivation. Finally,the bait vector was used to screen the interacted proteins in "Mate ＆ Plate^TM "Library and several potential interacted proteins were obtained. This work laid a foundation for further identification of NiNJA interacted proteins and related signaling pathway.
- NiNJA /
- pGBKT7 bait vector /
- autoactivation /
- yeast two-hybrid

[1]	梁梦微, 刘国银. 木薯MeCYP71E7基因克隆及功能分析 . 热带生物学报（中英文）, 2026, 17(): 1-12. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.20260074
[2]	林慧婷, 张宇霆, 赵奥特, 黄小龙, 吴文嫱, 黄东益, 夏薇. 参薯DaKNOX16基因的特征分析及互作蛋白的筛选验证 . 热带生物学报（中英文）, 2026, 17(4): 557-565. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.20250006
[3]	郑雨, 程潇, 程科, 赵惠萍. 木薯RLK1候选互作蛋白筛选及其与BSK互作的酵母验证 . 热带生物学报（中英文）, 2026, 17(2): 223-232. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.20240187
[4]	赵奥特, 林慧婷, 张宇霆, 黄小龙, 吴文墙, 夏薇, 黄东益. 参薯BBR-BPC基因家族的挖掘和特征分析 . 热带生物学报（中英文）, 2026, 17(3): 390-398. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.20250026
[5]	杨敏, 黄婧, 曹毓杰, 李东栋, 郑育声. 基于转录组的蛇皮果雌雄株差异基因的筛选和性别鉴定 . 热带生物学报（中英文）, 2025, 16(1): 13-20. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.20240110
[6]	谭梦婷, 徐浩然, 曾鸿秋. MeDAWDLE基因的克隆和蛋白功能验证 . 热带生物学报（中英文）, 2025, 16(3): 370-378. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.20240146
[7]	吴管吉, 周勋峻, 吴菲菲, 张引鹤, 黄颖华, 李雅忻, 高红桃, 李海燕. 大豆GmACBP6基因克隆及萌发期耐盐碱功能验证 . 热带生物学报（中英文）, 2024, 15(4): 382-390. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.20240060
[8]	王宇航, 孟秀利, 黄山春, 林兆威, 宋薇薇, 唐庆华, 覃伟权. 双条拂粉蚧基因组DNA提取方法的比较和优化 . 热带生物学报（中英文）, 2023, 14(6): 636-641. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.20220085
[9]	董晨, 魏永赞, 王弋, 郑雪文, 李伟才. 转录组荔枝Dof基因家族的鉴定及其表达 . 热带生物学报（中英文）, 2021, 12(1): 7-14. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2021.01.002
[10]	宋娜, 张刘宁颖, 曹敏, 郭文雅, 洪雨慧, 吴金山, 陈银华, 于晓惠. 木薯ERF转录因子调控的靶基因筛选与表达分析 . 热带生物学报（中英文）, 2020, 11(2): 177-189. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2020.02.008
[11]	刘益巧, 孙志华, 钱江, 长孙东亭, 罗素兰. CHRNA7基因荧光定量PCR检测方法的建立 . 热带生物学报（中英文）, 2019, 10(2): 178-183. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2019.02.013
[12]	耿晓姗, 刘秦, 党会杰, 武军政, 罗丽娟. 利用毒素蛋白基因ccdB构建高效低背景T-载体 . 热带生物学报（中英文）, 2016, 7(2): 232-236. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2016.02.016
[13]	黄超, 张丽丽, 邓柳红, 张春发. 海南五指山美洲商陆抗病毒蛋白PAP-Ⅰ基因的原核表达及活性验证 . 热带生物学报（中英文）, 2016, 7(1): 82-88. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2016.01.014
[14]	洪灏, 刘小婷, 肖华, 黄惜, 袁红梅. HbCoi1基因启动子酵母单杂pHIS载体的构建及互作蛋白筛选 . 热带生物学报（中英文）, 2015, 6(3): 256-260. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2015.03.006
[15]	龚付全, 李平华. 玉米自交系B73丙酮酸磷酸双激酶基因的克隆及低氮对PPDK表达的影响 . 热带生物学报（中英文）, 2014, 5(4): 326-333. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2014.04.004
[16]	吴伦英, 景晓辉, 沈雁. 类转录激活因子效应物及其在生物技术领域的应用 . 热带生物学报（中英文）, 2013, 4(4): 386-392. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2013.04.008
[17]	刘长仁, 刘伟, 翟金玲, 訾亮, 黄惜. 拟南芥AtGRP7基因诱饵载体的构建及酵母双杂的初筛 . 热带生物学报（中英文）, 2012, 3(2): 121-125. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2012.02.002
[18]	陈瑶, 沈文涛, 言普, 黎小瑛, 周鹏. 番木瓜环斑病毒CP基因dsRNA原核表达载体的快速构建 . 热带生物学报（中英文）, 2011, 2(2): 113-116. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2011.02.006
[19]	吴金燕, 言普, 沈文涛, 周鹏. 番木瓜eIF4E和eIFiso4E酵母双杂交诱饵表达载体的构建及自激活检测 . 热带生物学报（中英文）, 2010, 1(1): 50-54. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2010.01.014
[20]	秦云霞, 戚继艳, 唐朝荣. 橡胶树蔗糖转运蛋白基因SOS酵母双杂交体系的诱饵载体构建及自激活检测 . 热带生物学报（中英文）, 2010, 1(4): 314-320. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2010.04.015

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拟南芥NiNJA基因酵母双杂诱饵载体构建及互作蛋白的筛选

DOI: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2013.01.002

热带生物资源教育部重点实验室/生物科学技术研究所; 海南大学农学院, 海南海口 570228

基金项目:

教育部高等学校博士学科点专项科研基金博导类项目(20114601110003)

国家自然科学基金项目(31060107)

作者简介:
訾亮(1987－)，男，山东泰安人，海南大学农学院2010级硕士研究生．

通讯作者: 黄惜，教授，xihuang@hainu.edu.cn

收稿日期: 2013-03-10

中图分类号: Q782

关键词:

NiNJA基因 /

pGBKT7诱饵载体 /

自转录激活验证 /

酵母双杂

摘要: JAZ蛋白是植物茉莉酸信号途径的重要负调控因子,JAZ与NiNJA形成蛋白复合体抑制茉莉酸下游转录因子的转录活性,NiNJA蛋白是联系JAZ蛋白与下游转录因子的重要因子。为了研究NiNJA调控的下游基因,首先构建了NiNJA基因的诱饵载体pGBKT7-NiNJA,然后转化酵母Y2HGold感受态,通过自转录激活实验,发现诱饵载体pGBKT7-`没有自转录激活活性。在此基础上,从拟南芥"Mate & Plate^TM"Library进行酵母双杂筛选,获得若干个与NiNJA互作的蛋白,为下一步鉴定NiNJA的互作蛋白及茉莉酸的信号调控途径打下基础。

English Abstract

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第一作者: 訾亮(1987－)，男，山东泰安人，海南大学农学院2010级硕士研究生．

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拟南芥NiNJA基因酵母双杂诱饵载体构建及互作蛋白的筛选

DOI: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2013.01.002

热带生物资源教育部重点实验室/生物科学技术研究所; 海南大学农学院, 海南海口 570228

作者简介: 訾亮(1987－)，男，山东泰安人，海南大学农学院2010级硕士研究生．

通讯作者: 黄惜，教授，xihuang@hainu.edu.cn

English Abstract

Construction of Bait Vector for NiNJA Gene in Arabidopsis and Screening the Interacted Proteins Using Yeast Two-hybrid

1. Key Laboratory of Tropic Biological Resources of Ministry of Education/Institute of Bio-Science and Technology, College of Agromy, Hainan University, Haikou 570228, China

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第一作者:
訾亮(1987－)，男，山东泰安人，海南大学农学院2010级硕士研究生．

通信作者:
黄惜，教授，xihuang@hainu.edu.cn

作者简介:
訾亮(1987－)，男，山东泰安人，海南大学农学院2010级硕士研究生．