拟南芥<i>NiNJA</i>基因酵母双杂诱饵载体构建及互作蛋白的筛选

訾亮; 洪灏; 翟金玲; 马穗; 黄惜

doi:10.15886/j.cnki.rdswxb.2013.01.002

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拟南芥NiNJA基因酵母双杂诱饵载体构建及互作蛋白的筛选

訾亮, 洪灏, 翟金玲, 马穗, 黄惜

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訾亮, 洪灏, 翟金玲, 马穗, 黄惜. 拟南芥NiNJA基因酵母双杂诱饵载体构建及互作蛋白的筛选[J]. 热带生物学报, 2013, 4(1): 31-35. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2013.01.002

引用本文:

訾亮, 洪灏, 翟金玲, 马穗, 黄惜. 拟南芥NiNJA基因酵母双杂诱饵载体构建及互作蛋白的筛选[J]. 热带生物学报, 2013, 4(1): 31-35. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2013.01.002

ZI Liang, HONG Hao, ZHAI Jinling, MA Sui, HUANG Xi. Construction of Bait Vector for NiNJA Gene in Arabidopsis and Screening the Interacted Proteins Using Yeast Two-hybrid[J]. Journal of Tropical Biology, 2013, 4(1): 31-35. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2013.01.002

Citation:

ZI Liang, HONG Hao, ZHAI Jinling, MA Sui, HUANG Xi. Construction of Bait Vector for NiNJA Gene in Arabidopsis and Screening the Interacted Proteins Using Yeast Two-hybrid[J]. Journal of Tropical Biology, 2013, 4(1): 31-35. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2013.01.002

拟南芥NiNJA基因酵母双杂诱饵载体构建及互作蛋白的筛选

doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2013.01.002

訾亮^1,2,
洪灏^1,2,
翟金玲^1,2,
马穗^1,2,
黄惜^1,2, ,

热带生物资源教育部重点实验室/生物科学技术研究所; 海南大学农学院, 海南海口 570228

基金项目:

教育部高等学校博士学科点专项科研基金博导类项目(20114601110003)

国家自然科学基金项目(31060107)

详细信息

第一作者:
訾亮(1987－)，男，山东泰安人，海南大学农学院2010级硕士研究生．

通信作者:
黄惜，教授，xihuang@hainu.edu.cn

中图分类号: Q782

Construction of Bait Vector for NiNJA Gene in Arabidopsis and Screening the Interacted Proteins Using Yeast Two-hybrid

ZI Liang^1,2,
HONG Hao^1,2,
ZHAI Jinling^1,2,
MA Sui^1,2,
HUANG Xi^{1,2
, ,}

1. Key Laboratory of Tropic Biological Resources of Ministry of Education/Institute of Bio-Science and Technology, College of Agromy, Hainan University, Haikou 570228, China

摘要: JAZ蛋白是植物茉莉酸信号途径的重要负调控因子,JAZ与NiNJA形成蛋白复合体抑制茉莉酸下游转录因子的转录活性,NiNJA蛋白是联系JAZ蛋白与下游转录因子的重要因子。为了研究NiNJA调控的下游基因,首先构建了NiNJA基因的诱饵载体pGBKT7-NiNJA,然后转化酵母Y2HGold感受态,通过自转录激活实验,发现诱饵载体pGBKT7-`没有自转录激活活性。在此基础上,从拟南芥"Mate & Plate^TM"Library进行酵母双杂筛选,获得若干个与NiNJA互作的蛋白,为下一步鉴定NiNJA的互作蛋白及茉莉酸的信号调控途径打下基础。
- NiNJA基因 /
- pGBKT7诱饵载体 /
- 自转录激活验证 /
- 酵母双杂
Abstract: JAZ proteins are important negative factors for jasmonic acid （ JA） signaling pathways in Arabidopsis thaliana. NiNJA interacted with JAZ proteins to inhibit the transcription activity of JA-related transcription factors. NiNJA is a key factor that connected the JAZs and JA-related transcription factors. In order to screen NiNJA interacted proteins,NiNJA full-length cDNA sequence was PCR amplified inserted into pGBKT7 vector to construct a bait vector for yeast two-hybrid system. Furthermore,the vector was transformed into Y2H Gold strain. The result of autoactivation showed that pGBKT7-NiNJA vector had no autoactivation. Finally,the bait vector was used to screen the interacted proteins in "Mate ＆ Plate^TM "Library and several potential interacted proteins were obtained. This work laid a foundation for further identification of NiNJA interacted proteins and related signaling pathway.
- NiNJA /
- pGBKT7 bait vector /
- autoactivation /
- yeast two-hybrid

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[18]	吴伦英, 景晓辉, 沈雁. 类转录激活因子效应物及其在生物技术领域的应用 . 热带生物学报, 2013, 4(4): 386-392. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2013.04.008
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拟南芥NiNJA基因酵母双杂诱饵载体构建及互作蛋白的筛选

doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2013.01.002

热带生物资源教育部重点实验室/生物科学技术研究所; 海南大学农学院, 海南海口 570228

基金项目:

教育部高等学校博士学科点专项科研基金博导类项目(20114601110003)

国家自然科学基金项目(31060107)

作者简介:
訾亮(1987－)，男，山东泰安人，海南大学农学院2010级硕士研究生．

通讯作者: 黄惜，教授，xihuang@hainu.edu.cn

收稿日期: 2013-03-10

中图分类号: Q782

关键词:

NiNJA基因 /

pGBKT7诱饵载体 /

自转录激活验证 /

酵母双杂

摘要: JAZ蛋白是植物茉莉酸信号途径的重要负调控因子,JAZ与NiNJA形成蛋白复合体抑制茉莉酸下游转录因子的转录活性,NiNJA蛋白是联系JAZ蛋白与下游转录因子的重要因子。为了研究NiNJA调控的下游基因,首先构建了NiNJA基因的诱饵载体pGBKT7-NiNJA,然后转化酵母Y2HGold感受态,通过自转录激活实验,发现诱饵载体pGBKT7-`没有自转录激活活性。在此基础上,从拟南芥"Mate & Plate^TM"Library进行酵母双杂筛选,获得若干个与NiNJA互作的蛋白,为下一步鉴定NiNJA的互作蛋白及茉莉酸的信号调控途径打下基础。

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拟南芥NiNJA基因酵母双杂诱饵载体构建及互作蛋白的筛选

doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2013.01.002

第一作者: 訾亮(1987－)，男，山东泰安人，海南大学农学院2010级硕士研究生．

通信作者: 黄惜，教授，xihuang@hainu.edu.cn

Construction of Bait Vector for NiNJA Gene in Arabidopsis and Screening the Interacted Proteins Using Yeast Two-hybrid

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拟南芥NiNJA基因酵母双杂诱饵载体构建及互作蛋白的筛选

doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2013.01.002

热带生物资源教育部重点实验室/生物科学技术研究所; 海南大学农学院, 海南海口 570228

作者简介: 訾亮(1987－)，男，山东泰安人，海南大学农学院2010级硕士研究生．

通讯作者: 黄惜，教授，xihuang@hainu.edu.cn

English Abstract

Construction of Bait Vector for NiNJA Gene in Arabidopsis and Screening the Interacted Proteins Using Yeast Two-hybrid

1. Key Laboratory of Tropic Biological Resources of Ministry of Education/Institute of Bio-Science and Technology, College of Agromy, Hainan University, Haikou 570228, China

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第一作者:
訾亮(1987－)，男，山东泰安人，海南大学农学院2010级硕士研究生．

通信作者:
黄惜，教授，xihuang@hainu.edu.cn

作者简介:
訾亮(1987－)，男，山东泰安人，海南大学农学院2010级硕士研究生．