养殖日本囊对虾副溶血弧菌的分离与鉴定

王攀攀; 王军; 林瑶琼; 郑锦斌; 乔莹; 陈信忠; 毛勇

doi:10.15886/j.cnki.rdswxb.2015.04.004

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养殖日本囊对虾副溶血弧菌的分离与鉴定

王攀攀, 王军, 林瑶琼, 郑锦斌, 乔莹, 陈信忠, 毛勇

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王攀攀, 王军, 林瑶琼, 郑锦斌, 乔莹, 陈信忠, 毛勇. 养殖日本囊对虾副溶血弧菌的分离与鉴定[J]. 热带生物学报, 2015, 6(4): 374-380. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2015.04.004

引用本文:

WANG Panpan, WANG Jun, LIN Yaoqiong, ZHENG Jinbin, Qiao Ying, CHEN Xinzhong, MAO Yong. Isolation and Identification of Vibrio parahaemolyticus from Cultured Marsupenaeus japonicus[J]. Journal of Tropical Biology, 2015, 6(4): 374-380. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2015.04.004

Citation:

WANG Panpan, WANG Jun, LIN Yaoqiong, ZHENG Jinbin, Qiao Ying, CHEN Xinzhong, MAO Yong. Isolation and Identification of Vibrio parahaemolyticus from Cultured Marsupenaeus japonicus[J]. Journal of Tropical Biology, 2015, 6(4): 374-380. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2015.04.004

养殖日本囊对虾副溶血弧菌的分离与鉴定

doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2015.04.004

1. 厦门大学海洋与地球学院, 厦门, 361005;
2. 厦门出入境检验检疫局检验检疫技术中心, 厦门, 361026

基金项目:

厦门市南方海洋中心项目(14CZY033HJ07)

现代农业虾产业技术体系专项(CARS-47)

福建省海洋高新产业发展专项(闽海洋高新[2014]12号)

详细信息

第一作者:
王攀攀(1990-),男,厦门大学海洋与地球学院2014级硕士研究生.E-mail:panw90@126.com

通信作者:
毛勇(1970-),男,教授级高工.研究方向:海洋动物遗传育种.E-mail:maoyong@xmu.edu.cn

中图分类号: S945.45

Isolation and Identification of Vibrio parahaemolyticus from Cultured Marsupenaeus japonicus

1. College of Ocean and Earth Sciences, Xiamen University, Xiamen 361005, China;
2. Xiamen Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau, Xiamen 361026, China

摘要: 从患病的日本囊对虾（Marsupenaeus japonicus）的肝胰腺、胃和肠组织中分离到2株细菌MJBX-1和MJBX-2。人工感染实验结果表明,2株分离菌浓度为10⁷cfu·m L^-1时,均可致健康日本囊对虾100%死亡;在10⁶cfu·m L^-1浓度时,均可导致约90%的健康日本囊对虾死亡;该分离菌可使日本囊对虾致病,病状与养殖条件下的相似。MJBX-1和MJBX-2菌的主要特性为:革兰氏阴性,形状为弧状、杆状、丝状,无芽孢,大多有1个明显的弧形,在LB培养基上为透明或半透明的圆形菌落,在TCBS培养基上为绿色菌落。能在含2%,4%,6%,8%Na Cl的LB培养基上生长,但在含0,10%Na Cl的LB培养基上不生长。鉴定结果表明,2株分离菌均为副溶血性弧菌（Vibrio parahaemolyticus）。药敏实验结果表明,分离菌对氟苯尼考、诺氟沙星、呋喃妥因、链霉素、庆大霉素、卡那霉素等6种药物敏感,但对阿莫西林和四环素不敏感。
- 日本囊对虾 /
- 基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱 /
- 16S rRNA /
- 副溶血弧菌 /
- 药敏实验
Abstract: Two strains（ MJBX-1 and MJBX-2） of bacteria were isolated from the hepatopancreas,stomach and intestines of infected Marsupenaeus japonicus,and used for immersion challenge of V. parahaemolyticus to study their infectivity. These isolates induced 100% mortality of V. parahaemolyticus immersion challenged at the concentration of 10⁷ cfu·mL^-1,and 90% mortality at 10⁶cfu·mL^-1. Subsequent bacterial isolation from the challenged V. parahaemolyticus showed the same bacterial colony type as in the field samples. These isolates were gram-negative,arcshaped,rhabditiform or filamentous,without spore-forming,but mostly with an obvious arc shape. They formed transparent or translucent round colonies on the LB solid medium and green colonies on the TCBS medium. In the meantime,they could grow at the culture medium containing 2%,4%,6% or 8% of Na CL,but not 0% or 10% of Na CL. The isolated strains were preliminarily identified by using the matrix assisted laser desorption/ionization time of flight mass spectrometry（ MALDI-TOF-MS） through comparison of the mass spectrometry between the isolated strains and the standard strain. Moreover,their sequences were analyzed by using the 16 S rRNA to produce phylogenetic tree. The MALDI-TOF-MS and the 16 S rRNA analysis showed that the isolated strains MJBX-1 and MJBX-2 belonged to Vibrio parahaemolyticus. The antibiotic sensitivity test showed that MJBX-1 and MJBX-2 were sensitive to Florfenicol, Norfloxacin, Macrodantin, Gentamicin, Streptomycin and Kanamycin, but not to Amoxicillin and Tetracycline. This study will provide scientific reference for accurate,quick identification and control of the disease of V. parahaemolyticus caused by V. parahaemolyticus.
- Marsupenaeus japonicus /
- matrix-assisted laser desorption / ionization time of flight mass spectrometry /
- 16S rRNA /
- Vibrio parahaemolyticus /
- chemo-sensitivity test

[1]	申逸, 郭天赐, 来卓元, 易博, 林川, 朱贺然, 万逸, 毛海梅, 曲龙. 基于荧光光电技术的大肠杆菌药敏分析 . 热带生物学报, 2025, 16(): 1-8. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.20240149
[2]	梁晨, 陈祖静, 尤广怀, 吴晓杭, 黄慧明, 何观孔, 杨胜基. 桉树焦枯病对林分土壤细菌多样性的影响 . 热带生物学报, 2025, 16(2): 218-226. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.20240045
[3]	朱昆宇, 潘成才, 吉怡颖, 王宇, 周扬, 江行玉. 盐胁迫下冰菜盐囊泡细胞的比较代谢组学分析 . 热带生物学报, 2024, 15(2): 224-231. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.20230020
[4]	刘文, 董斌, 叶子龙, 谢月亮, 张祥会, 李荣喜, 刘光华. 不同催花方法对‘台农16号’凤梨开花和果实品质的影响 . 热带生物学报, 2024, 15(3): 315-322. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.20230091
[5]	常逢彤, 冯谦洁, 黎娜, 周海龙. 海巴戟果提取物对凡纳滨对虾副溶血性弧菌的抑制效应 . 热带生物学报, 2021, 12(1): 1-6. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2021.01.001
[6]	谢媚, 杨艺滢, 陈偿. 溶珊瑚弧菌hapR基因的敲除及功能研究 . 热带生物学报, 2020, 11(3): 266-273. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2020.03.002
[7]	陈耀丽, 俞龙春, 钱悦, 宋希强, 张哲. 大尖囊蝴蝶兰内生真菌和细菌的分离与鉴定 . 热带生物学报, 2019, 10(4): 372-379. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2019.04.011
[8]	徐晓津, 李秀华, 马一帆, 何俊, 李慧耀, 祁欣, 张蕉南, 王云才, 赵玲敏, 鄢庆枇. 50味中药及其复方与抗生素对河流弧菌的体外抑菌作用 . 热带生物学报, 2019, 10(4): 343-351. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2019.04.007
[9]	苏子寒, 高兆银, 胡美姣, 李敏, 张正科. 16种植物源活性成分对2种芒果采后病害的防治 . 热带生物学报, 2019, 10(1): 28-33. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2019.01.005
[10]	侯国锋, 曾家伟, 羊熙春, 王爱媛, 刘亚欣, 曾纪锋, 郭桂英, 杨诺, 李迁, 郑继平. CRISPR/Cas9的外膜囊泡转运与无乳链球菌清除 . 热带生物学报, 2018, 9(3): 295-301. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2018.03.005
[11]	张静雅, 刘宇鹏, 吴超, 邓益琴, 尹浩贤, 赵哲. 1株高产琼脂糖酶海洋弧菌的分离与酶活性的测定 . 热带生物学报, 2018, 9(2): 142-146. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2018.02.003
[12]	毛楷林, 林芳, 徐腾, 余作挺, 周海龙. 皱瘤海鞘被囊多肽的抗氧化活性 . 热带生物学报, 2017, 8(4): 431-435,458. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2017.04.010
[13]	高沿, 江晓, 任春华, 胡超群. 珠三角凡纳滨对虾白斑综合征病毒检测 . 热带生物学报, 2016, 7(3): 301-306. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2016.03.004
[14]	林冬冬, 骆大鹏, 邢诒炫. 3个凡纳滨对虾养殖群体生长性状间的关系 . 热带生物学报, 2016, 7(1): 10-16. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2016.01.002
[15]	王刚, 孙成波, 蔡传彬, 曹佩星. 哈维氏弧菌和白斑综合症病毒对墨吉明对虾仔虾的致病性 . 热带生物学报, 2016, 7(1): 1-9. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2016.01.001
[16]	柯杨勇, 赖秋明, 苏树叶, 林治宇. 1株乳酸菌在凡纳滨对虾养殖中的应用效果 . 热带生物学报, 2015, 6(1): 18-24. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2015.01.003
[17]	郎越, 孙佩甫, 袁潜华. 基于B/S结构海南普通野生稻资源数据库的构建 . 热带生物学报, 2015, 6(2): 147-152. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2015.02.007
[18]	李岚岚, 李增平, 陈熠. 无梗囊霉属真菌的分类特征及国内分布 . 热带生物学报, 2015, 6(3): 335-346. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2015.03.020
[19]	向赟, 王刚, 陈兆明, 张锐, 孙成波. 不同温度条件下鳗弧菌和白斑综合症病毒对凡纳滨对虾的致病性 . 热带生物学报, 2015, 6(1): 11-17. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2015.01.002
[20]	徐伊桦, 苏永全, 毛勇, 宋晓红, 张曼, 王军, 王春忠, 郑志鹏. 日本囊对虾ML基因的克隆与表达分析 . 热带生物学报, 2015, 6(4): 365-373. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2015.04.003

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养殖日本囊对虾副溶血弧菌的分离与鉴定

doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2015.04.004

1. 厦门大学海洋与地球学院, 厦门, 361005;

2. 厦门出入境检验检疫局检验检疫技术中心, 厦门, 361026

基金项目:

厦门市南方海洋中心项目(14CZY033HJ07)

现代农业虾产业技术体系专项(CARS-47)

福建省海洋高新产业发展专项(闽海洋高新[2014]12号)

作者简介:
王攀攀(1990-),男,厦门大学海洋与地球学院2014级硕士研究生.E-mail:panw90@126.com

通讯作者: 毛勇(1970-),男,教授级高工.研究方向:海洋动物遗传育种.E-mail:maoyong@xmu.edu.cn

收稿日期: 2015-04-06

中图分类号: S945.45

关键词:

16S rRNA /

摘要: 从患病的日本囊对虾（Marsupenaeus japonicus）的肝胰腺、胃和肠组织中分离到2株细菌MJBX-1和MJBX-2。人工感染实验结果表明,2株分离菌浓度为10⁷cfu·m L^-1时,均可致健康日本囊对虾100%死亡;在10⁶cfu·m L^-1浓度时,均可导致约90%的健康日本囊对虾死亡;该分离菌可使日本囊对虾致病,病状与养殖条件下的相似。MJBX-1和MJBX-2菌的主要特性为:革兰氏阴性,形状为弧状、杆状、丝状,无芽孢,大多有1个明显的弧形,在LB培养基上为透明或半透明的圆形菌落,在TCBS培养基上为绿色菌落。能在含2%,4%,6%,8%Na Cl的LB培养基上生长,但在含0,10%Na Cl的LB培养基上不生长。鉴定结果表明,2株分离菌均为副溶血性弧菌（Vibrio parahaemolyticus）。药敏实验结果表明,分离菌对氟苯尼考、诺氟沙星、呋喃妥因、链霉素、庆大霉素、卡那霉素等6种药物敏感,但对阿莫西林和四环素不敏感。

English Abstract

Isolation and Identification of Vibrio parahaemolyticus from Cultured Marsupenaeus japonicus

1. College of Ocean and Earth Sciences, Xiamen University, Xiamen 361005, China;

2. Xiamen Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau, Xiamen 361026, China

Received Date: 2015-04-06

Keywords:

Abstract: Two strains（ MJBX-1 and MJBX-2） of bacteria were isolated from the hepatopancreas,stomach and intestines of infected Marsupenaeus japonicus,and used for immersion challenge of V. parahaemolyticus to study their infectivity. These isolates induced 100% mortality of V. parahaemolyticus immersion challenged at the concentration of 10⁷ cfu·mL^-1,and 90% mortality at 10⁶cfu·mL^-1. Subsequent bacterial isolation from the challenged V. parahaemolyticus showed the same bacterial colony type as in the field samples. These isolates were gram-negative,arcshaped,rhabditiform or filamentous,without spore-forming,but mostly with an obvious arc shape. They formed transparent or translucent round colonies on the LB solid medium and green colonies on the TCBS medium. In the meantime,they could grow at the culture medium containing 2%,4%,6% or 8% of Na CL,but not 0% or 10% of Na CL. The isolated strains were preliminarily identified by using the matrix assisted laser desorption/ionization time of flight mass spectrometry（ MALDI-TOF-MS） through comparison of the mass spectrometry between the isolated strains and the standard strain. Moreover,their sequences were analyzed by using the 16 S rRNA to produce phylogenetic tree. The MALDI-TOF-MS and the 16 S rRNA analysis showed that the isolated strains MJBX-1 and MJBX-2 belonged to Vibrio parahaemolyticus. The antibiotic sensitivity test showed that MJBX-1 and MJBX-2 were sensitive to Florfenicol, Norfloxacin, Macrodantin, Gentamicin, Streptomycin and Kanamycin, but not to Amoxicillin and Tetracycline. This study will provide scientific reference for accurate,quick identification and control of the disease of V. parahaemolyticus caused by V. parahaemolyticus.

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养殖日本囊对虾副溶血弧菌的分离与鉴定

doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2015.04.004

第一作者: 王攀攀(1990-),男,厦门大学海洋与地球学院2014级硕士研究生.E-mail:panw90@126.com

通信作者: 毛勇(1970-),男,教授级高工.研究方向:海洋动物遗传育种.E-mail:maoyong@xmu.edu.cn

Isolation and Identification of Vibrio parahaemolyticus from Cultured Marsupenaeus japonicus

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养殖日本囊对虾副溶血弧菌的分离与鉴定

doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2015.04.004

1. 厦门大学海洋与地球学院, 厦门, 361005; 2. 厦门出入境检验检疫局检验检疫技术中心, 厦门, 361026

作者简介: 王攀攀(1990-),男,厦门大学海洋与地球学院2014级硕士研究生.E-mail:panw90@126.com

通讯作者: 毛勇(1970-),男,教授级高工.研究方向:海洋动物遗传育种.E-mail:maoyong@xmu.edu.cn

English Abstract

Isolation and Identification of Vibrio parahaemolyticus from Cultured Marsupenaeus japonicus

1. College of Ocean and Earth Sciences, Xiamen University, Xiamen 361005, China; 2. Xiamen Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau, Xiamen 361026, China

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第一作者:
王攀攀(1990-),男,厦门大学海洋与地球学院2014级硕士研究生.E-mail:panw90@126.com

通信作者:
毛勇(1970-),男,教授级高工.研究方向:海洋动物遗传育种.E-mail:maoyong@xmu.edu.cn

1. 厦门大学海洋与地球学院, 厦门, 361005;

2. 厦门出入境检验检疫局检验检疫技术中心, 厦门, 361026

作者简介:
王攀攀(1990-),男,厦门大学海洋与地球学院2014级硕士研究生.E-mail:panw90@126.com

1. College of Ocean and Earth Sciences, Xiamen University, Xiamen 361005, China;

2. Xiamen Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau, Xiamen 361026, China