水稻<i>OsCERK</i>2转基因植株的获得及初步分析

汪德锋; 陈艳; 肖文芳; 符秀梅; 肖晓蓉; 黎秀琼; 庞金环; 陈银华

doi:10.15886/j.cnki.rdswxb.2013.02.009

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水稻OsCERK2转基因植株的获得及初步分析

汪德锋, 陈艳, 肖文芳, 符秀梅, 肖晓蓉, 黎秀琼, 庞金环, 陈银华

文章导航 > 热带生物学报 > 2013 > 4(2): 146-152,159

汪德锋, 陈艳, 肖文芳, 符秀梅, 肖晓蓉, 黎秀琼, 庞金环, 陈银华. 水稻OsCERK2转基因植株的获得及初步分析[J]. 热带生物学报, 2013, 4(2): 146-152,159. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2013.02.009

引用本文:

汪德锋, 陈艳, 肖文芳, 符秀梅, 肖晓蓉, 黎秀琼, 庞金环, 陈银华. 水稻OsCERK2转基因植株的获得及初步分析[J]. 热带生物学报, 2013, 4(2): 146-152,159. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2013.02.009

WANG Defeng, CHEN Yan, XIAO Wenfang, FU Xiumei, XIAO Xiaorong, LI Xiuqiong, PANG Jinhuan, CHEN Yinhua. Obtaining and the Preliminary Analysis of Rice OsCERK2 Transgenic Plants[J]. Journal of Tropical Biology, 2013, 4(2): 146-152,159. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2013.02.009

Citation:

WANG Defeng, CHEN Yan, XIAO Wenfang, FU Xiumei, XIAO Xiaorong, LI Xiuqiong, PANG Jinhuan, CHEN Yinhua. Obtaining and the Preliminary Analysis of Rice OsCERK2 Transgenic Plants[J]. Journal of Tropical Biology, 2013, 4(2): 146-152,159. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2013.02.009

水稻OsCERK2转基因植株的获得及初步分析

doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2013.02.009

汪德锋^1,2,
陈艳³,
肖文芳^1,2,
符秀梅^1,2,
肖晓蓉^1,2,
黎秀琼³,
庞金环³,
陈银华^1,2, ,

1. 海南大学海南省热带生物资源可持续利用重点实验室, 海南海口 570228;
2. 中国科学院微生物研究所, 北京 10010;
3. 海南大学农学院, 海南海口 570228

基金项目:

转基因生物新品种培育重大专项(2009ZX08009-41B)

国家自然科学基金项目(31260345)

详细信息

第一作者:
汪德锋(1987-),男,贵州思南人,海南大学农学院2010级硕士研究生.

通信作者:
陈银华(1976-),男,海南大学农学院教授,硕士生导师.E-mail:yhchen@hainu.edu.cn

中图分类号: Q812

Obtaining and the Preliminary Analysis of Rice OsCERK2 Transgenic Plants

1. Hainan Key Laboratory for Sustainable Utilization of Tropical Bioresources, Hainan University, Haikou 570228, China;
2. Institute Of Microbiology Chinese Academy of Sciences, Beijing 10010, China;
3. Agriculture College of Hainan University, Haikou 570228, China

摘要: 以水稻粳稻品种日本晴为研究材料,利用拟南芥CERK1的蛋白质序列检索,在水稻基因组候选了与拟南芥CERK1同源的水稻基因OsCERK2,通过RT-PCR分离了该基因的全长cDNA。生物信息学分析显示,OsCERK2是一种含有信号肽的质膜蛋白,胞外结构域含有LsyM基序,激酶结构域含有酪氨酸蛋白激酶结构域。构建了由35S启动子驱动该基因的过表达遗传转化载体和由玉米的泛素基因的启动子驱动的RNA干涉(RNAi)的遗传转化载体,利用农杆菌介导的遗传转化技术,将OsCERK2基因导入水稻,得到T₀代转基因植株。对T₀代植株进行了PCR检测和半定量RT-PCR检测,获得了OsCERK2有效表达的转基因植株。
- 水稻(Oryza sativa) /
- OsCERK2 /
- 基因分离 /
- 载体构建 /
- 遗传转化 /
- RT-PCR
Abstract: In this study,Oryza sativa ssp. japonica var. Nipponbare used as material,the Arabidopsis CERK1 was used to retrieve its homologous genes in the rice genome and a rice homologous gene CERK2,OsCERK2 was obtained,which cDNA of OsCERK2 was isolated by RT-PCR. Bioinformatics analysis showed that OsCERK2 was a plasma membrane protein including a signal peptide,its extracellular domain included an LsyM domain,its kinase domain included a protein tyrosine kinase domain. Overexpression vector driven by 35S promoter and RNA interference （RNAi） vector driven by maize ubiquitin promoter were constructed. The OsCERK2 gene was then transferred into rice by Agrobacterium-mediated transformation. T₀ transgenic plants were obtained from each vector. Amplifying T₀ transgenic plants by PCR and RT-PCR showed transgenic plants with efficient expression were gained. The results would lay a foundation on further studying functions of OsCERK2.
- Oryza sativa /
- OsCERK2 /
- gene isolation /
- vector construction /
- Genetic transformation /
- RT-PCR

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[3]	刘之洋, 刘静, 宁宇, 戚仁洁, 徐海, 陈龙正. 基于Fast-Tracc方式建立苦瓜高效遗传转化体系的研究 . 热带生物学报, 2023, 14(6): 622-627. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.20230082
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水稻OsCERK2转基因植株的获得及初步分析

doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2013.02.009

1. 海南大学海南省热带生物资源可持续利用重点实验室, 海南海口 570228;

2. 中国科学院微生物研究所, 北京 10010;

3. 海南大学农学院, 海南海口 570228

基金项目:

转基因生物新品种培育重大专项(2009ZX08009-41B)

国家自然科学基金项目(31260345)

作者简介:
汪德锋(1987-),男,贵州思南人,海南大学农学院2010级硕士研究生.

通讯作者: 陈银华(1976-),男,海南大学农学院教授,硕士生导师.E-mail:yhchen@hainu.edu.cn

收稿日期: 2013-04-11

中图分类号: Q812

关键词:

OsCERK2 /

摘要: 以水稻粳稻品种日本晴为研究材料,利用拟南芥CERK1的蛋白质序列检索,在水稻基因组候选了与拟南芥CERK1同源的水稻基因OsCERK2,通过RT-PCR分离了该基因的全长cDNA。生物信息学分析显示,OsCERK2是一种含有信号肽的质膜蛋白,胞外结构域含有LsyM基序,激酶结构域含有酪氨酸蛋白激酶结构域。构建了由35S启动子驱动该基因的过表达遗传转化载体和由玉米的泛素基因的启动子驱动的RNA干涉(RNAi)的遗传转化载体,利用农杆菌介导的遗传转化技术,将OsCERK2基因导入水稻,得到T₀代转基因植株。对T₀代植株进行了PCR检测和半定量RT-PCR检测,获得了OsCERK2有效表达的转基因植株。

English Abstract

Obtaining and the Preliminary Analysis of Rice OsCERK2 Transgenic Plants

1. Hainan Key Laboratory for Sustainable Utilization of Tropical Bioresources, Hainan University, Haikou 570228, China;

2. Institute Of Microbiology Chinese Academy of Sciences, Beijing 10010, China;

3. Agriculture College of Hainan University, Haikou 570228, China

Received Date: 2013-04-11

Keywords:

Abstract: In this study,Oryza sativa ssp. japonica var. Nipponbare used as material,the Arabidopsis CERK1 was used to retrieve its homologous genes in the rice genome and a rice homologous gene CERK2,OsCERK2 was obtained,which cDNA of OsCERK2 was isolated by RT-PCR. Bioinformatics analysis showed that OsCERK2 was a plasma membrane protein including a signal peptide,its extracellular domain included an LsyM domain,its kinase domain included a protein tyrosine kinase domain. Overexpression vector driven by 35S promoter and RNA interference （RNAi） vector driven by maize ubiquitin promoter were constructed. The OsCERK2 gene was then transferred into rice by Agrobacterium-mediated transformation. T₀ transgenic plants were obtained from each vector. Amplifying T₀ transgenic plants by PCR and RT-PCR showed transgenic plants with efficient expression were gained. The results would lay a foundation on further studying functions of OsCERK2.

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水稻OsCERK2转基因植株的获得及初步分析

doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2013.02.009

第一作者: 汪德锋(1987-),男,贵州思南人,海南大学农学院2010级硕士研究生.

通信作者: 陈银华(1976-),男,海南大学农学院教授,硕士生导师.E-mail:yhchen@hainu.edu.cn

Obtaining and the Preliminary Analysis of Rice OsCERK2 Transgenic Plants

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水稻OsCERK2转基因植株的获得及初步分析

doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2013.02.009

1. 海南大学海南省热带生物资源可持续利用重点实验室, 海南海口 570228; 2. 中国科学院微生物研究所, 北京 10010; 3. 海南大学农学院, 海南海口 570228

作者简介: 汪德锋(1987-),男,贵州思南人,海南大学农学院2010级硕士研究生.

通讯作者: 陈银华(1976-),男,海南大学农学院教授,硕士生导师.E-mail:yhchen@hainu.edu.cn

English Abstract

Obtaining and the Preliminary Analysis of Rice OsCERK2 Transgenic Plants

1. Hainan Key Laboratory for Sustainable Utilization of Tropical Bioresources, Hainan University, Haikou 570228, China; 2. Institute Of Microbiology Chinese Academy of Sciences, Beijing 10010, China; 3. Agriculture College of Hainan University, Haikou 570228, China

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第一作者:
汪德锋(1987-),男,贵州思南人,海南大学农学院2010级硕士研究生.

通信作者:
陈银华(1976-),男,海南大学农学院教授,硕士生导师.E-mail:yhchen@hainu.edu.cn

1. 海南大学海南省热带生物资源可持续利用重点实验室, 海南海口 570228;

2. 中国科学院微生物研究所, 北京 10010;

3. 海南大学农学院, 海南海口 570228

作者简介:
汪德锋(1987-),男,贵州思南人,海南大学农学院2010级硕士研究生.

1. Hainan Key Laboratory for Sustainable Utilization of Tropical Bioresources, Hainan University, Haikou 570228, China;

2. Institute Of Microbiology Chinese Academy of Sciences, Beijing 10010, China;

3. Agriculture College of Hainan University, Haikou 570228, China