水稻<i>OsCERK</i>2转基因植株的获得及初步分析

汪德锋; 陈艳; 肖文芳; 符秀梅; 肖晓蓉; 黎秀琼; 庞金环; 陈银华

doi:10.15886/j.cnki.rdswxb.2013.02.009

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水稻OsCERK2转基因植株的获得及初步分析

汪德锋, 陈艳, 肖文芳, 符秀梅, 肖晓蓉, 黎秀琼, 庞金环, 陈银华

文章导航 > 热带生物学报（中英文） > 2013 > 4(2): 146-152,159

汪德锋, 陈艳, 肖文芳, 符秀梅, 肖晓蓉, 黎秀琼, 庞金环, 陈银华. 水稻OsCERK2转基因植株的获得及初步分析[J]. 热带生物学报（中英文）, 2013, 4(2): 146-152,159. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2013.02.009

引用本文:

汪德锋, 陈艳, 肖文芳, 符秀梅, 肖晓蓉, 黎秀琼, 庞金环, 陈银华. 水稻OsCERK2转基因植株的获得及初步分析[J]. 热带生物学报（中英文）, 2013, 4(2): 146-152,159. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2013.02.009

WANG Defeng, CHEN Yan, XIAO Wenfang, FU Xiumei, XIAO Xiaorong, LI Xiuqiong, PANG Jinhuan, CHEN Yinhua. Obtaining and the Preliminary Analysis of Rice OsCERK2 Transgenic Plants[J]. Journal of Tropical Biology, 2013, 4(2): 146-152,159. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2013.02.009

Citation:

WANG Defeng, CHEN Yan, XIAO Wenfang, FU Xiumei, XIAO Xiaorong, LI Xiuqiong, PANG Jinhuan, CHEN Yinhua. Obtaining and the Preliminary Analysis of Rice OsCERK2 Transgenic Plants[J]. Journal of Tropical Biology, 2013, 4(2): 146-152,159. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2013.02.009

水稻OsCERK2转基因植株的获得及初步分析

DOI: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2013.02.009

汪德锋^1,2,
陈艳³,
肖文芳^1,2,
符秀梅^1,2,
肖晓蓉^1,2,
黎秀琼³,
庞金环³,
陈银华^1,2, ,

1. 海南大学海南省热带生物资源可持续利用重点实验室, 海南海口 570228;
2. 中国科学院微生物研究所, 北京 10010;
3. 海南大学农学院, 海南海口 570228

基金项目:

转基因生物新品种培育重大专项(2009ZX08009-41B)

国家自然科学基金项目(31260345)

详细信息

第一作者:
汪德锋(1987-),男,贵州思南人,海南大学农学院2010级硕士研究生.

通信作者:
陈银华(1976-),男,海南大学农学院教授,硕士生导师.E-mail:yhchen@hainu.edu.cn

中图分类号: Q812

Obtaining and the Preliminary Analysis of Rice OsCERK2 Transgenic Plants

1. Hainan Key Laboratory for Sustainable Utilization of Tropical Bioresources, Hainan University, Haikou 570228, China;
2. Institute Of Microbiology Chinese Academy of Sciences, Beijing 10010, China;
3. Agriculture College of Hainan University, Haikou 570228, China

摘要: 以水稻粳稻品种日本晴为研究材料,利用拟南芥CERK1的蛋白质序列检索,在水稻基因组候选了与拟南芥CERK1同源的水稻基因OsCERK2,通过RT-PCR分离了该基因的全长cDNA。生物信息学分析显示,OsCERK2是一种含有信号肽的质膜蛋白,胞外结构域含有LsyM基序,激酶结构域含有酪氨酸蛋白激酶结构域。构建了由35S启动子驱动该基因的过表达遗传转化载体和由玉米的泛素基因的启动子驱动的RNA干涉(RNAi)的遗传转化载体,利用农杆菌介导的遗传转化技术,将OsCERK2基因导入水稻,得到T₀代转基因植株。对T₀代植株进行了PCR检测和半定量RT-PCR检测,获得了OsCERK2有效表达的转基因植株。
- 水稻(Oryza sativa) /
- OsCERK2 /
- 基因分离 /
- 载体构建 /
- 遗传转化 /
- RT-PCR
Abstract: In this study,Oryza sativa ssp. japonica var. Nipponbare used as material,the Arabidopsis CERK1 was used to retrieve its homologous genes in the rice genome and a rice homologous gene CERK2,OsCERK2 was obtained,which cDNA of OsCERK2 was isolated by RT-PCR. Bioinformatics analysis showed that OsCERK2 was a plasma membrane protein including a signal peptide,its extracellular domain included an LsyM domain,its kinase domain included a protein tyrosine kinase domain. Overexpression vector driven by 35S promoter and RNA interference （RNAi） vector driven by maize ubiquitin promoter were constructed. The OsCERK2 gene was then transferred into rice by Agrobacterium-mediated transformation. T₀ transgenic plants were obtained from each vector. Amplifying T₀ transgenic plants by PCR and RT-PCR showed transgenic plants with efficient expression were gained. The results would lay a foundation on further studying functions of OsCERK2.
- Oryza sativa /
- OsCERK2 /
- gene isolation /
- vector construction /
- Genetic transformation /
- RT-PCR

[1]	周荟森, 谭德冠, 王英, 付莉莉, 于颖, 孙雪飘, 张家明. 发根农杆菌介导的水角遗传转化体系的建立 . 热带生物学报（中英文）, 2025, 16(5): 755-764. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.20250038
[2]	谭梦婷, 徐浩然, 曾鸿秋. MeDAWDLE基因的克隆和蛋白功能验证 . 热带生物学报（中英文）, 2025, 16(3): 370-378. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.20240146
[3]	刘之洋, 刘静, 宁宇, 戚仁洁, 徐海, 陈龙正. 基于Fast-Tracc方式建立苦瓜高效遗传转化体系的研究 . 热带生物学报（中英文）, 2023, 14(6): 622-627. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.20230082
[4]	王伟伟, 安馨媛, 陈俊菁. 根癌农杆菌介导火龙果溃疡病菌遗传转化体系的构建及转化子筛选 . 热带生物学报（中英文）, 2022, 13(3): 243-248. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2022.03.006
[5]	费小雯, 张阳, 李亚军, 邓晓东. 伊蚊3HKT基因RNAi载体构建及口服对伊蚊的致死作用 . 热带生物学报（中英文）, 2021, 12(3): 356-362. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2021.03.012
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[7]	刘明乾, 吴绍华, 田郎, 张世鑫, 李言, 田维敏. 橡胶草悬浮细胞遗传转化体系的建立 . 热带生物学报（中英文）, 2018, 9(2): 176-182. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2018.02.008
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[9]	耿晓姗, 刘秦, 党会杰, 武军政, 罗丽娟. 利用毒素蛋白基因ccdB构建高效低背景T-载体 . 热带生物学报（中英文）, 2016, 7(2): 232-236. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2016.02.016
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[12]	洪灏, 刘小婷, 肖华, 黄惜, 袁红梅. HbCoi1基因启动子酵母单杂pHIS载体的构建及互作蛋白筛选 . 热带生物学报（中英文）, 2015, 6(3): 256-260. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2015.03.006
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[15]	訾亮, 洪灏, 翟金玲, 马穗, 黄惜. 拟南芥NiNJA基因酵母双杂诱饵载体构建及互作蛋白的筛选 . 热带生物学报（中英文）, 2013, 4(1): 31-35. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2013.01.002
[16]	刘长仁, 刘伟, 翟金玲, 訾亮, 黄惜. 拟南芥AtGRP7基因诱饵载体的构建及酵母双杂的初筛 . 热带生物学报（中英文）, 2012, 3(2): 121-125. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2012.02.002
[17]	陈瑶, 沈文涛, 言普, 黎小瑛, 周鹏. 番木瓜环斑病毒CP基因dsRNA原核表达载体的快速构建 . 热带生物学报（中英文）, 2011, 2(2): 113-116. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2011.02.006
[18]	秦云霞, 戚继艳, 唐朝荣. 橡胶树蔗糖转运蛋白基因SOS酵母双杂交体系的诱饵载体构建及自激活检测 . 热带生物学报（中英文）, 2010, 1(4): 314-320. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2010.04.015
[19]	张秀春, 李文彬, 夏亦荠, 彭明. AtNUDT8过量表达的拟南芥转基因植株 . 热带生物学报（中英文）, 2010, 1(1): 8-11. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2010.01.001
[20]	林生, 潘大仁, 周以飞, 陈观水, 张绪璋, 吴子峰. 果蔗SoSgt1基因的克隆表达与植物反义表达载体的构建 . 热带生物学报（中英文）, 2010, 1(1): 1-7. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2010.01.010

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水稻OsCERK2转基因植株的获得及初步分析

DOI: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2013.02.009

1. 海南大学海南省热带生物资源可持续利用重点实验室, 海南海口 570228;

2. 中国科学院微生物研究所, 北京 10010;

3. 海南大学农学院, 海南海口 570228

基金项目:

转基因生物新品种培育重大专项(2009ZX08009-41B)

国家自然科学基金项目(31260345)

作者简介:
汪德锋(1987-),男,贵州思南人,海南大学农学院2010级硕士研究生.

通讯作者: 陈银华(1976-),男,海南大学农学院教授,硕士生导师.E-mail:yhchen@hainu.edu.cn

收稿日期: 2013-04-11

中图分类号: Q812

关键词:

OsCERK2 /

摘要: 以水稻粳稻品种日本晴为研究材料,利用拟南芥CERK1的蛋白质序列检索,在水稻基因组候选了与拟南芥CERK1同源的水稻基因OsCERK2,通过RT-PCR分离了该基因的全长cDNA。生物信息学分析显示,OsCERK2是一种含有信号肽的质膜蛋白,胞外结构域含有LsyM基序,激酶结构域含有酪氨酸蛋白激酶结构域。构建了由35S启动子驱动该基因的过表达遗传转化载体和由玉米的泛素基因的启动子驱动的RNA干涉(RNAi)的遗传转化载体,利用农杆菌介导的遗传转化技术,将OsCERK2基因导入水稻,得到T₀代转基因植株。对T₀代植株进行了PCR检测和半定量RT-PCR检测,获得了OsCERK2有效表达的转基因植株。

English Abstract

Obtaining and the Preliminary Analysis of Rice OsCERK2 Transgenic Plants

1. Hainan Key Laboratory for Sustainable Utilization of Tropical Bioresources, Hainan University, Haikou 570228, China;

2. Institute Of Microbiology Chinese Academy of Sciences, Beijing 10010, China;

3. Agriculture College of Hainan University, Haikou 570228, China

Received Date: 2013-04-11

Keywords:

Abstract: In this study,Oryza sativa ssp. japonica var. Nipponbare used as material,the Arabidopsis CERK1 was used to retrieve its homologous genes in the rice genome and a rice homologous gene CERK2,OsCERK2 was obtained,which cDNA of OsCERK2 was isolated by RT-PCR. Bioinformatics analysis showed that OsCERK2 was a plasma membrane protein including a signal peptide,its extracellular domain included an LsyM domain,its kinase domain included a protein tyrosine kinase domain. Overexpression vector driven by 35S promoter and RNA interference （RNAi） vector driven by maize ubiquitin promoter were constructed. The OsCERK2 gene was then transferred into rice by Agrobacterium-mediated transformation. T₀ transgenic plants were obtained from each vector. Amplifying T₀ transgenic plants by PCR and RT-PCR showed transgenic plants with efficient expression were gained. The results would lay a foundation on further studying functions of OsCERK2.

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水稻OsCERK2转基因植株的获得及初步分析

DOI: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2013.02.009

第一作者: 汪德锋(1987-),男,贵州思南人,海南大学农学院2010级硕士研究生.

通信作者: 陈银华(1976-),男,海南大学农学院教授,硕士生导师.E-mail:yhchen@hainu.edu.cn

Obtaining and the Preliminary Analysis of Rice OsCERK2 Transgenic Plants

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水稻OsCERK2转基因植株的获得及初步分析

DOI: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2013.02.009

1. 海南大学海南省热带生物资源可持续利用重点实验室, 海南海口 570228; 2. 中国科学院微生物研究所, 北京 10010; 3. 海南大学农学院, 海南海口 570228

作者简介: 汪德锋(1987-),男,贵州思南人,海南大学农学院2010级硕士研究生.

通讯作者: 陈银华(1976-),男,海南大学农学院教授,硕士生导师.E-mail:yhchen@hainu.edu.cn

English Abstract

Obtaining and the Preliminary Analysis of Rice OsCERK2 Transgenic Plants

1. Hainan Key Laboratory for Sustainable Utilization of Tropical Bioresources, Hainan University, Haikou 570228, China; 2. Institute Of Microbiology Chinese Academy of Sciences, Beijing 10010, China; 3. Agriculture College of Hainan University, Haikou 570228, China

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第一作者:
汪德锋(1987-),男,贵州思南人,海南大学农学院2010级硕士研究生.

通信作者:
陈银华(1976-),男,海南大学农学院教授,硕士生导师.E-mail:yhchen@hainu.edu.cn

1. 海南大学海南省热带生物资源可持续利用重点实验室, 海南海口 570228;

2. 中国科学院微生物研究所, 北京 10010;

3. 海南大学农学院, 海南海口 570228

作者简介:
汪德锋(1987-),男,贵州思南人,海南大学农学院2010级硕士研究生.

1. Hainan Key Laboratory for Sustainable Utilization of Tropical Bioresources, Hainan University, Haikou 570228, China;

2. Institute Of Microbiology Chinese Academy of Sciences, Beijing 10010, China;

3. Agriculture College of Hainan University, Haikou 570228, China