水稻<i>OsCERK</i>2转基因后代的鉴定与分析

肖晓蓉; 苏桐慧; 廖华兰; 黎秀琼; 汪德锋; 符秀梅; 陈银华; 牛晓磊

doi:10.15886/j.cnki.rdswxb.2015.02.006

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水稻OsCERK2转基因后代的鉴定与分析

肖晓蓉, 苏桐慧, 廖华兰, 黎秀琼, 汪德锋, 符秀梅, 陈银华, 牛晓磊

文章导航 > 热带生物学报（中英文） > 2015 > 6(2): 141-146

肖晓蓉, 苏桐慧, 廖华兰, 黎秀琼, 汪德锋, 符秀梅, 陈银华, 牛晓磊. 水稻OsCERK2转基因后代的鉴定与分析[J]. 热带生物学报（中英文）, 2015, 6(2): 141-146. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2015.02.006

引用本文:

肖晓蓉, 苏桐慧, 廖华兰, 黎秀琼, 汪德锋, 符秀梅, 陈银华, 牛晓磊. 水稻OsCERK2转基因后代的鉴定与分析[J]. 热带生物学报（中英文）, 2015, 6(2): 141-146. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2015.02.006

XIAO Xiaorong, SU Tonghui, LIAO Hualan, LI Xiuqiong, WANG Defeng, FU Xiumei, CHEN Yinhua, NIU Xiaolei. Identification and Analysis of OsCERK2 Transgenic Progeny of Rice[J]. Journal of Tropical Biology, 2015, 6(2): 141-146. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2015.02.006

Citation:

XIAO Xiaorong, SU Tonghui, LIAO Hualan, LI Xiuqiong, WANG Defeng, FU Xiumei, CHEN Yinhua, NIU Xiaolei. Identification and Analysis of OsCERK2 Transgenic Progeny of Rice[J]. Journal of Tropical Biology, 2015, 6(2): 141-146. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2015.02.006

水稻OsCERK2转基因后代的鉴定与分析

DOI: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2015.02.006

肖晓蓉^1,2,
苏桐慧^1,2,
廖华兰^1,2,
黎秀琼^1,2,
汪德锋^1,2,
符秀梅^1,2,
陈银华^1,2,
牛晓磊^1,2, ,

1. 海南大学海南省热带生物资源可持续利用重点实验室, 海南海口 570228;
2. 海南大学农学院, 海南海口 570228

基金项目:

转基因生物新品种培育重大专项(2009ZX08009-41B)

国家自然科学基金项目(31260345)

详细信息

第一作者:
肖晓蓉(1990-),女,海南大学农学院2012级硕士研究生.E-mail:xiaorong1990829@163.com

通信作者:
牛晓磊,男,讲师.研究方向:植物与病原微生物的互作.E-mail:ninterxll@hainu.edu.cn

中图分类号: Q943.2;S511

Identification and Analysis of OsCERK2 Transgenic Progeny of Rice

XIAO Xiaorong^1,2,
SU Tonghui^1,2,
LIAO Hualan^1,2,
LI Xiuqiong^1,2,
WANG Defeng^1,2,
FU Xiumei^1,2,
CHEN Yinhua^1,2,
NIU Xiaolei^{1,2
, ,}

1. Hainan Key Laboratory for Sustainable Utilization of Tropical Bioresources, Hainan University, Haikou 570228, China;
2. College of Agronomy, Hainan University, Haikou 570228, China

摘要: 为了研究水稻OsCERK2基因的功能,构建了OsCERK2基因过表达和RNAi载体,利用农杆菌介导的遗传转化获得转基因植株,经多代筛选和分子检测,获得了4个超量表达的过表达纯系和2个转录水平下降的RNAi纯系。转基因植株经病原微生物细胞壁成分喷雾处理,采用半定量RT-PCR方法分析转基因植株中病程相关(PR)基因的表达情况,结果发现,诱导后过表达植株中PR基因表达增强,而RNAi植株中表达下降;抗病性鉴定结果表明,过表达转基因植株对白叶枯菌致病小种PXO99的抗性增强,而RNAi植株与野生型差异不显著。结果表明,过量表达OsCERK2基因可能是水稻抗病的有效途径。
- OsCERK2 /
- 转基因 /
- 几丁质 /
- PR基因 /
- 植物抗病反应
Abstract: To study the biological function of OsCERK2 gene,we constructed the OsCERK2 gene overexpression and RNA interference vectors by modifying p CAMBIA1300 and p TCK303 as framework plasmid,and then transferred the vectors respectively into the rice through Agrobacterium-mediated genetic transformation. Molecular detection produced four overexpressing homozygous lines and two RNAi homozygous lines with reduced transcriptional level. The transgenic plants of the OE lines and RNAi lines were sprayed with peptidoglycan prepared from the cell wall of both race PXO99（ Xoo- R6） of Xanthomonas oryzae pv. oryzae（ PGNXoo） and the strain JB01-25 of X. oryzae pv. oryzicola（ PGNXoc） and Chitin Mo from the cell wall of Magnaporthe oryzae,with water as control. The expression of pathogenesis related（ PR） genes were determined by using the semi-quantitative RTPCR. The results showed that the plants of overexpressing lines improved the expression of their PR genes while the plants of RNAi expressing line reduced the expression of the PR genes,as compared with the nontransgenic rice. Furthermore,the plants of overexpressing transgenic lines exhibited high tolerance to PXO99,but there were not significantly different between the RNAi plants and the wild type. These results indicated that OsCERK2 overexpressing gene may be an effective way to disease tolerance of rice.
- OsCERK2 /
- transgenic /
- chitin /
- PR gene /
- plant disease tolerance

[1]	卓媛, 韦露. 癫痫相关基因chd2在斑马鱼胚胎中的时空表达特征 . 热带生物学报（中英文）, 2026, 17(): 1-9. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.20260082
[2]	门佳丽, 李芳, 孙进华, 许云. 荔枝‘妃子笑’AP2同源基因的克隆及表达 . 热带生物学报（中英文）, 2020, 11(2): 190-199. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2020.02.009
[3]	冯翠莲, 万玥, 赵婷婷, 王俊刚, 冯小艳, 张树珍. 抗虫转基因甘蔗对土壤酶活性的影响 . 热带生物学报（中英文）, 2020, 11(1): 1-6. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2020.01.001
[4]	李亮, 梅双双, 戎伟. 3个基因共同参与拟南芥对橡胶树白粉菌的抗病性 . 热带生物学报（中英文）, 2018, 9(1): 31-36. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2018.01.004
[5]	黄超, 张丽丽, 邓柳红, 张春发. 海南五指山美洲商陆抗病毒蛋白PAP-Ⅰ基因的原核表达及活性验证 . 热带生物学报（中英文）, 2016, 7(1): 82-88. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2016.01.014
[6]	张若依云, 何美丹, 李栋, 袁睿智, 李润, 袁潜华, 裴新梧. 不同水深条件对普通野生稻及其转基因水稻杂种F₁的影响 . 热带生物学报（中英文）, 2016, 7(3): 325-331. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2016.03.008
[7]	易小平, 谭燕华, 彭存智, 谢翔, 贺萍萍. 转基因作物安全评价的检测技术 . 热带生物学报（中英文）, 2015, 6(1): 98-104. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2015.01.015
[8]	应佳志, 毕政鸿, 陈涛, 华玉伟. 巴西橡胶树LEAFY基因的克隆及其对拟南芥的转化 . 热带生物学报（中英文）, 2015, 6(3): 250-255. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2015.03.005
[9]	汪德锋, 陈艳, 肖文芳, 符秀梅, 肖晓蓉, 黎秀琼, 庞金环, 陈银华. 水稻OsCERK2转基因植株的获得及初步分析 . 热带生物学报（中英文）, 2013, 4(2): 146-152,159. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2013.02.009
[10]	魏巍, 杨腊英, 周端咏, 谢德啸, 黄小娟, 刘一贤, 黄俊生. 香蕉枯萎病菌fgb2基因的克隆与序列分析20120213 . 热带生物学报（中英文）, 2012, 3(2): 138-141. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2012.02.010
[11]	王雪兵, 于旭东, 朱会军, 吴繁花, 黄小凤, 胡新文. 巢蕨基因组DNA提取与RAPD反应体系优化 . 热带生物学报（中英文）, 2012, 3(4): 379-383386. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2012.04.019
[12]	彭军, 黄俊生. 植物内源小RNA及其介导的基因沉默途径 . 热带生物学报（中英文）, 2011, 2(2): 187-192. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2011.02.002
[13]	戴海燕, 王华, 文少敏, 解娜, 邓芳成. 牙龈卟啉菌菌毛基因在转基因番茄果实中的特异表达及小鼠免疫实验 . 热带生物学报（中英文）, 2011, 2(3): 204-208. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2011.03.006
[14]	武媛丽, 杨本鹏, 蔡文伟, 张树珍. 利用高效液相色谱法测定转基因甘蔗中的低聚果糖 . 热带生物学报（中英文）, 2011, 2(2): 101-106. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2011.02.008
[15]	王晓音, 赵婷婷, 冯翠莲, 张树珍. DNA提取方法对转基因甘蔗PCR检测的影响 . 热带生物学报（中英文）, 2011, 2(2): 138-142. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2011.02.011
[16]	尹昭坤, 乔健, 袁潜华. 转基因水稻向普通野生稻及其他近缘植物的基因漂流研究进展 . 热带生物学报（中英文）, 2011, 2(4): 373-377. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2011.04.013
[17]	罗红丽, 陈银华. 植物抗病反应相关转录因子的研究进展 . 热带生物学报（中英文）, 2011, 2(1): 83-88. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2011.01.007
[18]	李泽友, 沈文涛, 言普, 李亚丽, 周鹏. 番木瓜CYP79A2基因片段的克隆与序列分析 . 热带生物学报（中英文）, 2010, 1(1): 55-58. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2010.01.015
[19]	王树昌. 植物抗旱基因工程研究进展 . 热带生物学报（中英文）, 2010, 1(4): 376-379. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2010.04.003
[20]	张秀春, 李文彬, 夏亦荠, 彭明. AtNUDT8过量表达的拟南芥转基因植株 . 热带生物学报（中英文）, 2010, 1(1): 8-11. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2010.01.001

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水稻OsCERK2转基因后代的鉴定与分析

DOI: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2015.02.006

1. 海南大学海南省热带生物资源可持续利用重点实验室, 海南海口 570228;

2. 海南大学农学院, 海南海口 570228

基金项目:

转基因生物新品种培育重大专项(2009ZX08009-41B)

国家自然科学基金项目(31260345)

作者简介:
肖晓蓉(1990-),女,海南大学农学院2012级硕士研究生.E-mail:xiaorong1990829@163.com

通讯作者: 牛晓磊,男,讲师.研究方向:植物与病原微生物的互作.E-mail:ninterxll@hainu.edu.cn

收稿日期: 2015-04-12

中图分类号: Q943.2;S511

关键词:

OsCERK2 /

转基因 /

几丁质 /

PR基因 /

植物抗病反应

摘要: 为了研究水稻OsCERK2基因的功能,构建了OsCERK2基因过表达和RNAi载体,利用农杆菌介导的遗传转化获得转基因植株,经多代筛选和分子检测,获得了4个超量表达的过表达纯系和2个转录水平下降的RNAi纯系。转基因植株经病原微生物细胞壁成分喷雾处理,采用半定量RT-PCR方法分析转基因植株中病程相关(PR)基因的表达情况,结果发现,诱导后过表达植株中PR基因表达增强,而RNAi植株中表达下降;抗病性鉴定结果表明,过表达转基因植株对白叶枯菌致病小种PXO99的抗性增强,而RNAi植株与野生型差异不显著。结果表明,过量表达OsCERK2基因可能是水稻抗病的有效途径。

English Abstract

Identification and Analysis of OsCERK2 Transgenic Progeny of Rice

1. Hainan Key Laboratory for Sustainable Utilization of Tropical Bioresources, Hainan University, Haikou 570228, China;

2. College of Agronomy, Hainan University, Haikou 570228, China

Received Date: 2015-04-12

Keywords:

Abstract: To study the biological function of OsCERK2 gene,we constructed the OsCERK2 gene overexpression and RNA interference vectors by modifying p CAMBIA1300 and p TCK303 as framework plasmid,and then transferred the vectors respectively into the rice through Agrobacterium-mediated genetic transformation. Molecular detection produced four overexpressing homozygous lines and two RNAi homozygous lines with reduced transcriptional level. The transgenic plants of the OE lines and RNAi lines were sprayed with peptidoglycan prepared from the cell wall of both race PXO99（ Xoo- R6） of Xanthomonas oryzae pv. oryzae（ PGNXoo） and the strain JB01-25 of X. oryzae pv. oryzicola（ PGNXoc） and Chitin Mo from the cell wall of Magnaporthe oryzae,with water as control. The expression of pathogenesis related（ PR） genes were determined by using the semi-quantitative RTPCR. The results showed that the plants of overexpressing lines improved the expression of their PR genes while the plants of RNAi expressing line reduced the expression of the PR genes,as compared with the nontransgenic rice. Furthermore,the plants of overexpressing transgenic lines exhibited high tolerance to PXO99,but there were not significantly different between the RNAi plants and the wild type. These results indicated that OsCERK2 overexpressing gene may be an effective way to disease tolerance of rice.

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水稻OsCERK2转基因后代的鉴定与分析

DOI: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2015.02.006

第一作者: 肖晓蓉(1990-),女,海南大学农学院2012级硕士研究生.E-mail:xiaorong1990829@163.com

通信作者: 牛晓磊,男,讲师.研究方向:植物与病原微生物的互作.E-mail:ninterxll@hainu.edu.cn

Identification and Analysis of OsCERK2 Transgenic Progeny of Rice

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水稻OsCERK2转基因后代的鉴定与分析

DOI: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2015.02.006

1. 海南大学海南省热带生物资源可持续利用重点实验室, 海南海口 570228; 2. 海南大学农学院, 海南海口 570228

作者简介: 肖晓蓉(1990-),女,海南大学农学院2012级硕士研究生.E-mail:xiaorong1990829@163.com

通讯作者: 牛晓磊,男,讲师.研究方向:植物与病原微生物的互作.E-mail:ninterxll@hainu.edu.cn

English Abstract

Identification and Analysis of OsCERK2 Transgenic Progeny of Rice

1. Hainan Key Laboratory for Sustainable Utilization of Tropical Bioresources, Hainan University, Haikou 570228, China; 2. College of Agronomy, Hainan University, Haikou 570228, China

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第一作者:
肖晓蓉(1990-),女,海南大学农学院2012级硕士研究生.E-mail:xiaorong1990829@163.com

通信作者:
牛晓磊,男,讲师.研究方向:植物与病原微生物的互作.E-mail:ninterxll@hainu.edu.cn

1. 海南大学海南省热带生物资源可持续利用重点实验室, 海南海口 570228;

2. 海南大学农学院, 海南海口 570228

作者简介:
肖晓蓉(1990-),女,海南大学农学院2012级硕士研究生.E-mail:xiaorong1990829@163.com

1. Hainan Key Laboratory for Sustainable Utilization of Tropical Bioresources, Hainan University, Haikou 570228, China;

2. College of Agronomy, Hainan University, Haikou 570228, China