水稻<i>OsCERK</i>2转基因后代的鉴定与分析

肖晓蓉; 苏桐慧; 廖华兰; 黎秀琼; 汪德锋; 符秀梅; 陈银华; 牛晓磊

doi:10.15886/j.cnki.rdswxb.2015.02.006

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水稻OsCERK2转基因后代的鉴定与分析

肖晓蓉, 苏桐慧, 廖华兰, 黎秀琼, 汪德锋, 符秀梅, 陈银华, 牛晓磊

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肖晓蓉, 苏桐慧, 廖华兰, 黎秀琼, 汪德锋, 符秀梅, 陈银华, 牛晓磊. 水稻OsCERK2转基因后代的鉴定与分析[J]. 热带生物学报, 2015, 6(2): 141-146. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2015.02.006

引用本文:

肖晓蓉, 苏桐慧, 廖华兰, 黎秀琼, 汪德锋, 符秀梅, 陈银华, 牛晓磊. 水稻OsCERK2转基因后代的鉴定与分析[J]. 热带生物学报, 2015, 6(2): 141-146. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2015.02.006

XIAO Xiaorong, SU Tonghui, LIAO Hualan, LI Xiuqiong, WANG Defeng, FU Xiumei, CHEN Yinhua, NIU Xiaolei. Identification and Analysis of OsCERK2 Transgenic Progeny of Rice[J]. Journal of Tropical Biology, 2015, 6(2): 141-146. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2015.02.006

Citation:

XIAO Xiaorong, SU Tonghui, LIAO Hualan, LI Xiuqiong, WANG Defeng, FU Xiumei, CHEN Yinhua, NIU Xiaolei. Identification and Analysis of OsCERK2 Transgenic Progeny of Rice[J]. Journal of Tropical Biology, 2015, 6(2): 141-146. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2015.02.006

水稻OsCERK2转基因后代的鉴定与分析

doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2015.02.006

肖晓蓉^1,2,
苏桐慧^1,2,
廖华兰^1,2,
黎秀琼^1,2,
汪德锋^1,2,
符秀梅^1,2,
陈银华^1,2,
牛晓磊^1,2, ,

1. 海南大学海南省热带生物资源可持续利用重点实验室, 海南海口 570228;
2. 海南大学农学院, 海南海口 570228

基金项目:

转基因生物新品种培育重大专项(2009ZX08009-41B)

国家自然科学基金项目(31260345)

详细信息

第一作者:
肖晓蓉(1990-),女,海南大学农学院2012级硕士研究生.E-mail:xiaorong1990829@163.com

通信作者:
牛晓磊,男,讲师.研究方向:植物与病原微生物的互作.E-mail:ninterxll@hainu.edu.cn

中图分类号: Q943.2;S511

Identification and Analysis of OsCERK2 Transgenic Progeny of Rice

XIAO Xiaorong^1,2,
SU Tonghui^1,2,
LIAO Hualan^1,2,
LI Xiuqiong^1,2,
WANG Defeng^1,2,
FU Xiumei^1,2,
CHEN Yinhua^1,2,
NIU Xiaolei^{1,2
, ,}

1. Hainan Key Laboratory for Sustainable Utilization of Tropical Bioresources, Hainan University, Haikou 570228, China;
2. College of Agronomy, Hainan University, Haikou 570228, China

摘要: 为了研究水稻OsCERK2基因的功能,构建了OsCERK2基因过表达和RNAi载体,利用农杆菌介导的遗传转化获得转基因植株,经多代筛选和分子检测,获得了4个超量表达的过表达纯系和2个转录水平下降的RNAi纯系。转基因植株经病原微生物细胞壁成分喷雾处理,采用半定量RT-PCR方法分析转基因植株中病程相关(PR)基因的表达情况,结果发现,诱导后过表达植株中PR基因表达增强,而RNAi植株中表达下降;抗病性鉴定结果表明,过表达转基因植株对白叶枯菌致病小种PXO99的抗性增强,而RNAi植株与野生型差异不显著。结果表明,过量表达OsCERK2基因可能是水稻抗病的有效途径。
- OsCERK2 /
- 转基因 /
- 几丁质 /
- PR基因 /
- 植物抗病反应
Abstract: To study the biological function of OsCERK2 gene,we constructed the OsCERK2 gene overexpression and RNA interference vectors by modifying p CAMBIA1300 and p TCK303 as framework plasmid,and then transferred the vectors respectively into the rice through Agrobacterium-mediated genetic transformation. Molecular detection produced four overexpressing homozygous lines and two RNAi homozygous lines with reduced transcriptional level. The transgenic plants of the OE lines and RNAi lines were sprayed with peptidoglycan prepared from the cell wall of both race PXO99（ Xoo- R6） of Xanthomonas oryzae pv. oryzae（ PGNXoo） and the strain JB01-25 of X. oryzae pv. oryzicola（ PGNXoc） and Chitin Mo from the cell wall of Magnaporthe oryzae,with water as control. The expression of pathogenesis related（ PR） genes were determined by using the semi-quantitative RTPCR. The results showed that the plants of overexpressing lines improved the expression of their PR genes while the plants of RNAi expressing line reduced the expression of the PR genes,as compared with the nontransgenic rice. Furthermore,the plants of overexpressing transgenic lines exhibited high tolerance to PXO99,but there were not significantly different between the RNAi plants and the wild type. These results indicated that OsCERK2 overexpressing gene may be an effective way to disease tolerance of rice.
- OsCERK2 /
- transgenic /
- chitin /
- PR gene /
- plant disease tolerance

[1]	唐璐芝, 吴竞远, 陈元来, 朱彬彬, 赵惠萍. 木薯RXam2的原核蛋白表达及抗病功能分析 . 热带生物学报, 2025, 16(): 1-9. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.20240147
[2]	赵阳, 刘爽, 王志彪, 伍俊宇, 陈代朋, 郑丽. 香蕉枯萎病菌候选效应蛋白FoSSP80能抑制植物免疫反应 . 热带生物学报, 2025, 16(1): 87-97. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.20240019
[3]	羊娥月, 李杨, 莫明珠, 杨东梅, 刘亚, 吴友根, 于靖. 越南油茶CdMYC2基因克隆、生物信息学分析与表达模式研究 . 热带生物学报, 2025, 16(): 1-9. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.20250031
[4]	董晨, 郑雪文, 王弋, 全振炫, 李伟才. 荔枝GRF基因家族的全基因组鉴定及表达分析 . 热带生物学报, 2024, 15(2): 190-197. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.20230099
[5]	徐春华, 李超萍, 时涛, 王国芬, 蔡吉苗, 李博勋, 黄贵修. 木薯细菌性萎蔫病菌2个候选抗铜基因簇的克隆和分析 . 热带生物学报, 2023, 14(5): 499-505. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.20220009
[6]	符丹凤, 刘洪涛, 杨明秋, 何玉贵. 斑节对虾PmML1和PmML2基因的鉴定及表达分析 . 热带生物学报, 2022, 13(5): 440-450. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2022.05.003
[7]	谢媚, 杨艺滢, 陈偿. 溶珊瑚弧菌hapR基因的敲除及功能研究 . 热带生物学报, 2020, 11(3): 266-273. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2020.03.002
[8]	叶鸿鹰, 梅双双, 戎伟. ATAF2正调控拟南芥对橡胶树白粉菌的抗病性 . 热带生物学报, 2020, 11(1): 58-62. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2020.01.009
[9]	门佳丽, 李芳, 孙进华, 许云. 荔枝‘妃子笑’AP2同源基因的克隆及表达 . 热带生物学报, 2020, 11(2): 190-199. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2020.02.009
[10]	冯翠莲, 万玥, 赵婷婷, 王俊刚, 冯小艳, 张树珍. 抗虫转基因甘蔗对土壤酶活性的影响 . 热带生物学报, 2020, 11(1): 1-6. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2020.01.001
[11]	任宁, 陈秀珍, 夏幽泉, 白雪杨, 江行玉, 周扬. 木薯MeNRT2.5基因的克隆及表达分析 . 热带生物学报, 2019, 10(2): 111-118. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2019.02.003
[12]	李亮, 梅双双, 戎伟. 3个基因共同参与拟南芥对橡胶树白粉菌的抗病性 . 热带生物学报, 2018, 9(1): 31-36. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2018.01.004
[13]	贺瑞, 彭赟, 刘扬, 曾灿彬, 徐敏, 齐钊, 闫臻, 骆娟, 阮云泽, 何朝族, 汤华. 低氮胁迫下香蕉硝酸盐转运蛋白MaNRT2基因的克隆与表达分析 . 热带生物学报, 2016, 7(1): 76-81. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2016.01.013
[14]	黄超, 张丽丽, 邓柳红, 张春发. 海南五指山美洲商陆抗病毒蛋白PAP-Ⅰ基因的原核表达及活性验证 . 热带生物学报, 2016, 7(1): 82-88. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2016.01.014
[15]	张若依云, 何美丹, 李栋, 袁睿智, 李润, 袁潜华, 裴新梧. 不同水深条件对普通野生稻及其转基因水稻杂种F₁的影响 . 热带生物学报, 2016, 7(3): 325-331. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2016.03.008
[16]	汪倩, 何朝族, 罗红丽. 橡胶树胶孢炭疽病菌CgBASP2基因敲除突变体构建及其致病力分析 . 热带生物学报, 2015, 6(1): 41-46. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2015.01.006
[17]	郑鹏飞, 刁晓平, 宋芹芹, 杜俊俏, 程华民, 王海花, 张禹. Oct4,Sox2,Nanog和c-Myc基因在蚯蚓发育早期的表达 . 热带生物学报, 2015, 6(2): 134-140. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2015.02.005
[18]	郑云柯, 胡翔宇, 宋希强, 王健. 石斛属植物基因组DNA提取方法的对比 . 热带生物学报, 2015, 6(2): 168-172. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2015.02.011
[19]	易小平, 谭燕华, 彭存智, 谢翔, 贺萍萍. 转基因作物安全评价的检测技术 . 热带生物学报, 2015, 6(1): 98-104. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2015.01.015
[20]	应佳志, 毕政鸿, 陈涛, 华玉伟. 巴西橡胶树LEAFY基因的克隆及其对拟南芥的转化 . 热带生物学报, 2015, 6(3): 250-255. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2015.03.005

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水稻OsCERK2转基因后代的鉴定与分析

doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2015.02.006

1. 海南大学海南省热带生物资源可持续利用重点实验室, 海南海口 570228;

2. 海南大学农学院, 海南海口 570228

基金项目:

转基因生物新品种培育重大专项(2009ZX08009-41B)

国家自然科学基金项目(31260345)

作者简介:
肖晓蓉(1990-),女,海南大学农学院2012级硕士研究生.E-mail:xiaorong1990829@163.com

通讯作者: 牛晓磊,男,讲师.研究方向:植物与病原微生物的互作.E-mail:ninterxll@hainu.edu.cn

收稿日期: 2015-04-12

中图分类号: Q943.2;S511

关键词:

OsCERK2 /

转基因 /

几丁质 /

PR基因 /

植物抗病反应

摘要: 为了研究水稻OsCERK2基因的功能,构建了OsCERK2基因过表达和RNAi载体,利用农杆菌介导的遗传转化获得转基因植株,经多代筛选和分子检测,获得了4个超量表达的过表达纯系和2个转录水平下降的RNAi纯系。转基因植株经病原微生物细胞壁成分喷雾处理,采用半定量RT-PCR方法分析转基因植株中病程相关(PR)基因的表达情况,结果发现,诱导后过表达植株中PR基因表达增强,而RNAi植株中表达下降;抗病性鉴定结果表明,过表达转基因植株对白叶枯菌致病小种PXO99的抗性增强,而RNAi植株与野生型差异不显著。结果表明,过量表达OsCERK2基因可能是水稻抗病的有效途径。

English Abstract

Identification and Analysis of OsCERK2 Transgenic Progeny of Rice

1. Hainan Key Laboratory for Sustainable Utilization of Tropical Bioresources, Hainan University, Haikou 570228, China;

2. College of Agronomy, Hainan University, Haikou 570228, China

Received Date: 2015-04-12

Keywords:

Abstract: To study the biological function of OsCERK2 gene,we constructed the OsCERK2 gene overexpression and RNA interference vectors by modifying p CAMBIA1300 and p TCK303 as framework plasmid,and then transferred the vectors respectively into the rice through Agrobacterium-mediated genetic transformation. Molecular detection produced four overexpressing homozygous lines and two RNAi homozygous lines with reduced transcriptional level. The transgenic plants of the OE lines and RNAi lines were sprayed with peptidoglycan prepared from the cell wall of both race PXO99（ Xoo- R6） of Xanthomonas oryzae pv. oryzae（ PGNXoo） and the strain JB01-25 of X. oryzae pv. oryzicola（ PGNXoc） and Chitin Mo from the cell wall of Magnaporthe oryzae,with water as control. The expression of pathogenesis related（ PR） genes were determined by using the semi-quantitative RTPCR. The results showed that the plants of overexpressing lines improved the expression of their PR genes while the plants of RNAi expressing line reduced the expression of the PR genes,as compared with the nontransgenic rice. Furthermore,the plants of overexpressing transgenic lines exhibited high tolerance to PXO99,but there were not significantly different between the RNAi plants and the wild type. These results indicated that OsCERK2 overexpressing gene may be an effective way to disease tolerance of rice.

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水稻OsCERK2转基因后代的鉴定与分析

doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2015.02.006

第一作者: 肖晓蓉(1990-),女,海南大学农学院2012级硕士研究生.E-mail:xiaorong1990829@163.com

通信作者: 牛晓磊,男,讲师.研究方向:植物与病原微生物的互作.E-mail:ninterxll@hainu.edu.cn

Identification and Analysis of OsCERK2 Transgenic Progeny of Rice

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出版历程

水稻OsCERK2转基因后代的鉴定与分析

doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2015.02.006

1. 海南大学海南省热带生物资源可持续利用重点实验室, 海南海口 570228; 2. 海南大学农学院, 海南海口 570228

作者简介: 肖晓蓉(1990-),女,海南大学农学院2012级硕士研究生.E-mail:xiaorong1990829@163.com

通讯作者: 牛晓磊,男,讲师.研究方向:植物与病原微生物的互作.E-mail:ninterxll@hainu.edu.cn

English Abstract

Identification and Analysis of OsCERK2 Transgenic Progeny of Rice

1. Hainan Key Laboratory for Sustainable Utilization of Tropical Bioresources, Hainan University, Haikou 570228, China; 2. College of Agronomy, Hainan University, Haikou 570228, China

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第一作者:
肖晓蓉(1990-),女,海南大学农学院2012级硕士研究生.E-mail:xiaorong1990829@163.com

通信作者:
牛晓磊,男,讲师.研究方向:植物与病原微生物的互作.E-mail:ninterxll@hainu.edu.cn

1. 海南大学海南省热带生物资源可持续利用重点实验室, 海南海口 570228;

2. 海南大学农学院, 海南海口 570228

作者简介:
肖晓蓉(1990-),女,海南大学农学院2012级硕士研究生.E-mail:xiaorong1990829@163.com

1. Hainan Key Laboratory for Sustainable Utilization of Tropical Bioresources, Hainan University, Haikou 570228, China;

2. College of Agronomy, Hainan University, Haikou 570228, China