农杆菌介导的木薯遗传转化体系的优化

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农杆菌介导的木薯遗传转化体系的优化

廖华兰, 黎秀琼, 李可, 李伯凌, 熊茜, 苏童, 李春霞, 陈银华, 罗丽娟

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廖华兰, 黎秀琼, 李可, 李伯凌, 熊茜, 苏童, 李春霞, 陈银华, 罗丽娟. 农杆菌介导的木薯遗传转化体系的优化[J]. 热带生物学报, 2016, 7(4): 427-434. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2016.04.004

引用本文:

廖华兰, 黎秀琼, 李可, 李伯凌, 熊茜, 苏童, 李春霞, 陈银华, 罗丽娟. 农杆菌介导的木薯遗传转化体系的优化[J]. 热带生物学报, 2016, 7(4): 427-434. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2016.04.004

LIAO HuaLan, LI XiuQiong, LI Ke, LI BoLing, XIONG XI, SU Tong, LI ChunXia, CHEN YinHua, LUO LiJun. The Optimization System for Agrobacterium-mediated Genetic Transformation of Cassava[J]. Journal of Tropical Biology, 2016, 7(4): 427-434. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2016.04.004

Citation:

LIAO HuaLan, LI XiuQiong, LI Ke, LI BoLing, XIONG XI, SU Tong, LI ChunXia, CHEN YinHua, LUO LiJun. The Optimization System for Agrobacterium-mediated Genetic Transformation of Cassava[J]. Journal of Tropical Biology, 2016, 7(4): 427-434. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2016.04.004

农杆菌介导的木薯遗传转化体系的优化

doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2016.04.004

海南大学农学院/海南省热带生物资源可持续利用重点实验室, 海口, 570228

基金项目:

国家自然科学基金(31260345,31560497)

海南省重大科技项目(ZDZX2013023-2)

第一作者:
廖华兰(1989-),女,海南大学农学院2013级硕士研究生.E-mail:545404788@qq.com

通信作者:
李春霞(1980-),女,副教授.研究方向:病原菌致病分子机理.E-mail:chun_xia_li@126.com

中图分类号: S533

The Optimization System for Agrobacterium-mediated Genetic Transformation of Cassava

The Agricultural College of Hainan University/Hainan Key Laboratory for Sustainable Utilization of Tropical Bioresources, Hainan University, Haikou, Hainan 570228, China

摘要: 以木薯腋芽为外植体,通过添加不同含量的2,4-D和picloram摸索诱导体细胞胚及FEC的最佳激素条件;利用优化的再生体系,以木薯脆性胚性愈伤组织（FEC）为受体,对农杆菌侵染FEC的侵染浓度、侵染时间以及侵染后潮霉素抗性筛选浓度进行了研究。结果表明,12 mg·L^-1的picloram能较快诱导出体细胞胚及FEC;农杆菌菌液浓度OD₆₀₀=0.4并侵染30 min为FEC转化效率及植株再生率的最佳条件;共培养后,通过逐渐增加潮霉素筛选浓度(0,5,8,15 mg·L^-1)能更有效地提高植株的再生率。
- 木薯 /
- 组织培养 /
- 报告基因 /
- 遗传转化 /
- 分子鉴定
Abstract: Cassava axillary buds was used as explants,by adding different concentrations of 2,4-D and picloram to explore the best hormone condition for inducing somatic embryos and FEC; Using optimized regeneration system,studying the infection concentration、infection time of of Agrobacterium and the Screening concentration of hygromycin. The results show that: 12 mg·L^-1 picloram is the best hormone concentration to induction somatic embryo and FEC; the optimal conditions for the conversion efficiency of FEC and the plant regeneration is OD₆₀₀= 0. 4 of Agrobacterium and 30 min infection time,By increasing the concentration of hygromycin( 0,5,8,15 mg·L^-1) selection is more advantageous to plant regeneration. The results of the study have optimized the existing cassava genetic transformation system,which provides a platform for cassava genetic engineering breeding.
- cassava /
- tissue organ culture /
- reporter gene /
- genetic transformation /
- molecular characterization

[1]	李慈云, 杨静, 卢东莹, 杨健飞, 杨琦, 王菲, 陈银华, 牛晓磊. 菜豆黄单胞菌侵染下木薯内参基因筛选与评价 . 热带生物学报, 2025, 16(): 1-8. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.20240201
[2]	刘小丽, 韦运谢. 木薯MeAux/IAA19基因的克隆及功能初探 . 热带生物学报, 2025, 16(): 1-7. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.20240145
[3]	何娇妍, 陈奥, 闫语. 木薯MeKIN10与MeRAV1/2蛋白互作结构域鉴定 . 热带生物学报, 2025, 16(): 1-10. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.20250028
[4]	张子赫, 郑蔺玲, 李可, 陈银华, 高豫. 木薯ERF基因家族Ⅶ亚族的鉴定与表达分析 . 热带生物学报, 2025, 16(): 1-15. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.20250035
[5]	胡文成, 朱寿松, 王艺璇, 阳达, 陈银华. 木薯茉莉酸氧化酶JOXs基因家族的鉴定及表达模式分析 . 热带生物学报, 2025, 16(): 1-10. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.20240199
[6]	童立豪, 黄良夫, 吴翔宇, 石耀华, 唐贤明. 切段部位、长度和培养温度对琼枝藻繁殖的影响 . 热带生物学报, 2024, 15(3): 361-367. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.20230102
[7]	贾素行, 朱寿松, 符仁稳, 李春霞, 陈银华. 木薯MePPD3基因的克隆及功能分析 . 热带生物学报, 2024, 15(1): 10-18. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.20230035
[8]	冯亚亭, 张逸杰, 林南方, 陈银华, 骆凯. 木薯不同组织内生细菌多样性的比较分析 . 热带生物学报, 2024, 15(2): 141-149. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.20230077
[9]	刘之洋, 刘静, 宁宇, 戚仁洁, 徐海, 陈龙正. 基于Fast-Tracc方式建立苦瓜高效遗传转化体系的研究 . 热带生物学报, 2023, 14(6): 622-627. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.20230082
[10]	王伟伟, 安馨媛, 陈俊菁. 根癌农杆菌介导火龙果溃疡病菌遗传转化体系的构建及转化子筛选 . 热带生物学报, 2022, 13(3): 243-248. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2022.03.006
[11]	宋娜, 张刘宁颖, 曹敏, 郭文雅, 洪雨慧, 吴金山, 陈银华, 于晓惠. 木薯ERF转录因子调控的靶基因筛选与表达分析 . 热带生物学报, 2020, 11(2): 177-189. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2020.02.008
[12]	任宁, 陈秀珍, 夏幽泉, 白雪杨, 江行玉, 周扬. 木薯MeNRT2.5基因的克隆及表达分析 . 热带生物学报, 2019, 10(2): 111-118. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2019.02.003
[13]	侯鹏宇, 于心怡, 肖晓蓉, 郑琳琳, 陈银华. 木薯MKK家族基因的鉴定及表达分析 . 热带生物学报, 2019, 10(2): 119-126. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2019.02.004
[14]	刘明乾, 吴绍华, 田郎, 张世鑫, 李言, 田维敏. 橡胶草悬浮细胞遗传转化体系的建立 . 热带生物学报, 2018, 9(2): 176-182. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2018.02.008
[15]	唐枝娟, 朱寿松, 于心怡, 赵锐, 牛晓磊, 陈银华, 耿梦婷. 木薯MeRbohE基因的克隆及表达分析 . 热带生物学报, 2018, 9(2): 170-175. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2018.02.007
[16]	陆露, 蒋细旺. 白妙樱的组织培养和快速繁殖 . 热带生物学报, 2018, 9(3): 333-338. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2018.03.010
[17]	徐琳, 张泽, 吕贤哲, 李肇通, 黄惜. 烟草NtD14基因的遗传转化及其功能 . 热带生物学报, 2018, 9(4): 401-408. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2018.04.006
[18]	王树昌, 于晓玲, 李淑霞, 阮孟斌, 彭明. 木薯MeHDS09基因克隆及其对逆境信号的响应 . 热带生物学报, 2017, 8(4): 409-414. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2017.04.006
[19]	张长正, 刘进平, 时涛, 李超萍, 陈奕鹏, 黄贵修. 木薯地毯草黄单胞菌转化子T-DNA插入模式分析 . 热带生物学报, 2016, 7(2): 246-252. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2016.02.018
[20]	任希望, 梁丽雯, 王鹤鸣, 廖华兰, 林道哲, 黎秀琼, 陈银华. 木薯细菌性枯萎病病原菌的分离与鉴定 . 热带生物学报, 2015, 6(1): 59-64. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2015.01.009

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农杆菌介导的木薯遗传转化体系的优化

doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2016.04.004

海南大学农学院/海南省热带生物资源可持续利用重点实验室, 海口, 570228

基金项目:

国家自然科学基金(31260345,31560497)

海南省重大科技项目(ZDZX2013023-2)

作者简介:
廖华兰(1989-),女,海南大学农学院2013级硕士研究生.E-mail:545404788@qq.com

通讯作者: 李春霞(1980-),女,副教授.研究方向:病原菌致病分子机理.E-mail:chun_xia_li@126.com

收稿日期: 2016-03-16

中图分类号: S533

关键词:

摘要: 以木薯腋芽为外植体,通过添加不同含量的2,4-D和picloram摸索诱导体细胞胚及FEC的最佳激素条件;利用优化的再生体系,以木薯脆性胚性愈伤组织（FEC）为受体,对农杆菌侵染FEC的侵染浓度、侵染时间以及侵染后潮霉素抗性筛选浓度进行了研究。结果表明,12 mg·L^-1的picloram能较快诱导出体细胞胚及FEC;农杆菌菌液浓度OD₆₀₀=0.4并侵染30 min为FEC转化效率及植株再生率的最佳条件;共培养后,通过逐渐增加潮霉素筛选浓度(0,5,8,15 mg·L^-1)能更有效地提高植株的再生率。

English Abstract

廖华兰, 黎秀琼, 李可, 李伯凌, 熊茜, 苏童, 李春霞, 陈银华, 罗丽娟. 农杆菌介导的木薯遗传转化体系的优化[J]. 热带生物学报, 2016, 7(4): 427-434. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2016.04.004

引用本文:

廖华兰, 黎秀琼, 李可, 李伯凌, 熊茜, 苏童, 李春霞, 陈银华, 罗丽娟. 农杆菌介导的木薯遗传转化体系的优化[J]. 热带生物学报, 2016, 7(4): 427-434. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2016.04.004

LIAO HuaLan, LI XiuQiong, LI Ke, LI BoLing, XIONG XI, SU Tong, LI ChunXia, CHEN YinHua, LUO LiJun. The Optimization System for Agrobacterium-mediated Genetic Transformation of Cassava[J]. Journal of Tropical Biology, 2016, 7(4): 427-434. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2016.04.004

Citation:

LIAO HuaLan, LI XiuQiong, LI Ke, LI BoLing, XIONG XI, SU Tong, LI ChunXia, CHEN YinHua, LUO LiJun. The Optimization System for Agrobacterium-mediated Genetic Transformation of Cassava[J]. Journal of Tropical Biology, 2016, 7(4): 427-434. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2016.04.004

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