罗非鱼无乳链球菌拮抗菌的分离、鉴定及多样性分析

赵光军; 周永灿; 杨慧; 蔡岩; 张晗; 谢珍玉; 王世锋; 李聪

doi:10.15886/j.cnki.rdswxb.2014.04.002

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罗非鱼无乳链球菌拮抗菌的分离、鉴定及多样性分析

赵光军, 周永灿, 杨慧, 蔡岩, 张晗, 谢珍玉, 王世锋, 李聪

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赵光军, 周永灿, 杨慧, 蔡岩, 张晗, 谢珍玉, 王世锋, 李聪. 罗非鱼无乳链球菌拮抗菌的分离、鉴定及多样性分析[J]. 热带生物学报（中英文）, 2014, 5(4): 312-319,356. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2014.04.002

引用本文:

ZHAO Guangjun, ZHOU Yongcan, YANG Hui, CAI Yan, ZHANG Han, XIE Zhenyu, WANG Shifeng, LI Cong. Isolation,Identification and Diversity Analysis of Antagonistic Bacteria Against Tilapia Pathogen Streptococcus agalactiae[J]. Journal of Tropical Biology, 2014, 5(4): 312-319,356. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2014.04.002

Citation:

ZHAO Guangjun, ZHOU Yongcan, YANG Hui, CAI Yan, ZHANG Han, XIE Zhenyu, WANG Shifeng, LI Cong. Isolation,Identification and Diversity Analysis of Antagonistic Bacteria Against Tilapia Pathogen Streptococcus agalactiae[J]. Journal of Tropical Biology, 2014, 5(4): 312-319,356. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2014.04.002

罗非鱼无乳链球菌拮抗菌的分离、鉴定及多样性分析

DOI: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2014.04.002

赵光军^1,2,
周永灿^1,2,
杨慧²,
蔡岩²,
张晗²,
谢珍玉²,
王世锋^1,2, ,,
李聪²

1. 海南大学海洋学院/热带生物资源可持续利用省部共建国家重点实验室培育基地, 海南海口 570228;
2. 海南大学海洋学院/海南省水生生物技术重点实验室, 海南海口 570228

基金项目:

海南大学研究生实践教学资助项目

海南大学青年基金(qnjj1206)

海南大学海南各类资源考察项目海南省产学研一体化专项资金(CXY0130028)

海口市重点科技项目

海南大学地方服务项目

海南省重点科技计划项目(ZDXM20120005)

详细信息

第一作者:
赵光军(1988-),男,海南大学2011级硕士研究生,从事水产动物病害与防治研究.E-mail:zgj0106@163.com

通信作者:
王世锋(1977-),副教授.E-mail:shifeng_15@163.com

中图分类号: Q93-331

Isolation,Identification and Diversity Analysis of Antagonistic Bacteria Against Tilapia Pathogen Streptococcus agalactiae

1. State Key Laboratory Breeding Base for Sustainable Exploitation of Tropical Bioresources, Hainan University, Haikou 570228;
2. Hainan Provincial Key Laboratory for Tropical Hydrobiology & Biotechnology, College of Marine Sciences, Hainan University, Haikou 570228, China

摘要: 采用径向扩散法筛选对罗非鱼致病性无乳链球菌具有拮抗作用的益生菌,利用16S r DNA对拮抗菌进行鉴定,构建系统发育树对拮抗菌的多样性进行分析,并通过腹腔注射法测定其对罗非鱼的安全性。结果表明,从8个采样点共分离细菌1 759株,其中59株对无乳链球菌具有较强的拮抗作用,抑菌圈直径为10.6mm³0.8 mm,平均21.9 mm;16S r DNA分子鉴定及系统进化树分析显示,59株拮抗菌分为5属8个种,其中芽孢杆菌属（Bacillus）45株、假单胞菌属（Pseudomonas）5株、肠球菌属（Enterococcus）2株、类芽孢杆菌属（Paenibacillus）2株和葡萄球菌属（Staphylococcus）5株。鱼体安全性试验显示,有22株拮抗菌对罗非鱼不具有致病性,可作为防治罗非鱼无乳链球菌病的备选菌株。
- 罗非鱼 /
- 无乳链球菌 /
- 拮抗菌
Abstract: Antagonistic bacteria against tilapia Streptococcus agalactiae were isolated using Radial Diffusion Assay（ RDA） method and identified using 16 S r DNA sequencing technique. A phylogenetic tree was also constructed to analyze the diversity of the antagonistic bacteria isolated. Intraperitoneal injection method was used to test the toxicity of the isolated antagonistic bacteria against tilapia fishes. Results showed that 59 of the 1 759 strains of the bacteria isolated from eight freshwater ponds showed strong antagonistic effect against Streptococcus agalactiae. The diameter of the inhibition zones ranged from 10. 6 mm to 30. 8 mm with an average value of 21. 9mm.The 16 S r DNA sequencing and phytogenetic tree analysis indicated that these 59 strains of bacteria belong to 5genus and 8 species,including genus Bacillus（ 45 strains）,genus Pseudomonas（ 5 strains）,genus Enterococcus（ 2 strains）,genus Paenibacillus（ 2 stains） and genus Staphylococcus（ 5 strains）. The toxicity tolerance test showed that 22 strains were nontoxic to tilapia fishes. These nontoxic strains can be used as alternative antagonistic bacterial strains to control and prevent from tilapia Streptococcus disease in the future.
- tilapia /
- Streptococcus agalactiae /
- antagonistic probiotics

[1]	肖瀛, 韩宁筱, 李芹, 李小华, 林新, 徐礼裕, 张怀东. 噬菌体裂解酶作为新型抗菌药物的研究进展 . 热带生物学报（中英文）, 2026, 17(1): 19-28. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.20250107
[2]	郑辰尧, 安馨媛, 杨繁兴, 孙晓娜, 吴多旺, 吴郝然, 王睿. 黄瓜枯萎病菌拮抗木霉筛选及其抑菌蛋白功能分析 . 热带生物学报（中英文）, 2026, 17(): 1-11. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.20250174
[3]	陈佩蔚, 陈耀丽, 刘阳平, 宋希强, 刘铜, 王伟伟. 血叶兰茎腐病菌拮抗木霉的筛选及其生防潜力的评估 . 热带生物学报（中英文）, 2025, 16(): 1-10. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.20250027
[4]	张瑶瑶, 郑玉华, 孙建波, 朱白婢, 熊国如, 李淑霞, 彭明, 李春强. 镰刀菌枯萎病拮抗菌LCQ1801的分离鉴定、生防作用及其在有机基质中的生长情况 . 热带生物学报（中英文）, 2025, 16(1): 71-78. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.20230023
[5]	张小枫, 苏禹, 董欣怡, 刘月茹, 周洪旭, 范银君. 橘小实蝇抗菌肽全基因组鉴定和表达模式分析 . 热带生物学报（中英文）, 2024, 15(6): 672-682. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.20240130
[6]	贾新蕾, 黄增朝, 杨林狄, 吕静, 李妍萍, 简纪常, 黄郁葱. 不同培养温度的鱼源海豚链球菌转录组分析 . 热带生物学报（中英文）, 2024, 15(1): 109-121. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.20230027
[7]	陈钦镇, 李飞航, 武浩恒, 林向民, 王树启, 陈家林, 刘柱. 耐硼赖氨酸芽孢杆菌的保护剂筛选及其对罗非鱼肠道微生物群落的影响 . 热带生物学报（中英文）, 2023, 14(2): 214-220. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2023.02.011
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[9]	云莉, 倪雅丽. 茴香醛对变异链球菌的抗菌活性和抗生物被膜活性 . 热带生物学报（中英文）, 2022, 13(6): 614-621. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2022.06.011
[10]	刘双龙, 杨德洁, 牛晓庆, 杨福孙, 覃伟权. 槟榔根腐病菌拮抗菌株的筛选与鉴定 . 热带生物学报（中英文）, 2022, 13(3): 235-242. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2022.03.005
[11]	葛春晖, 尤文静, 蒋泽橙, 成梓瑜, 汤月, 邵远志. 火龙果采后病原菌的鉴定及其防控处理的优化 . 热带生物学报（中英文）, 2021, 12(2): 228-235. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2021.02.012
[12]	侯国锋, 曾家伟, 羊熙春, 王爱媛, 刘亚欣, 曾纪锋, 郭桂英, 杨诺, 李迁, 郑继平. CRISPR/Cas9的外膜囊泡转运与无乳链球菌清除 . 热带生物学报（中英文）, 2018, 9(3): 295-301. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2018.03.005
[13]	刘海天, 赵光军, 郭晓慧, 张永政, 周永灿, 蔡岩, 谢珍玉, 郭伟良, 王世锋. 无乳链球菌对罗非鱼粘液的粘附特性 . 热带生物学报（中英文）, 2016, 7(2): 153-158. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2016.02.002
[14]	高云慨, 张荣意, 钟利文, 宋海超, 史学群. 1株新分离拮抗酵母菌株对芒果炭疽病生防效果及其分类鉴定 . 热带生物学报（中英文）, 2015, 6(1): 47-52. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2015.01.007
[15]	孙亮, 刘文波, 杨廷雅, 和虹宇, 邬国良, 张宇, 缪卫国, 郑服丛. 枯草芽孢杆菌HAB-1产生抗菌物质的最优发酵条件 . 热带生物学报（中英文）, 2013, 4(3): 225-231,235. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2013.03.007
[16]	张晗, 周永灿, 赵光军, 蔡岩, 谢珍玉, 郭伟良, 王世锋. 测定无乳链球菌灭活疫苗浓度的分光光度法 . 热带生物学报（中英文）, 2013, 4(4): 369-373. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2013.04.016
[17]	李晓陀, 陈秦, 廖承红, 郭桂英, 李祥, 贾晓琳, 郑继平, 俞集楠. 发病罗非鱼苗沃氏葡萄球菌的分离与鉴定 . 热带生物学报（中英文）, 2013, 4(1): 7-10,24. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2013.01.015
[18]	陈兴汉, 刘晓春, 蒙子宁, 张勇, 林浩然, 叶卫. 尼罗罗非鱼仔鱼个体发育及性腺分化的发育 . 热带生物学报（中英文）, 2012, 3(3): 197-203. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2012.03.017
[19]	于文媛, 王世锋, 谢珍玉, 陈诏, 周永灿. 合浦珠母贝抗菌肽粗提液制备方法的优化 . 热带生物学报（中英文）, 2011, 2(1): 14-20. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2011.01.016
[20]	罗永兰, 张翼, 张志元. 油菜菌核菌拮抗性柑桔内生细菌的筛选及菌种鉴定 . 热带生物学报（中英文）, 2011, 2(1): 26-29. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2011.01.006

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罗非鱼无乳链球菌拮抗菌的分离、鉴定及多样性分析

DOI: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2014.04.002

1. 海南大学海洋学院/热带生物资源可持续利用省部共建国家重点实验室培育基地, 海南海口 570228;

2. 海南大学海洋学院/海南省水生生物技术重点实验室, 海南海口 570228

基金项目:

海南大学研究生实践教学资助项目

海南大学青年基金(qnjj1206)

海南大学海南各类资源考察项目海南省产学研一体化专项资金(CXY0130028)

海口市重点科技项目

海南大学地方服务项目

海南省重点科技计划项目(ZDXM20120005)

作者简介:
赵光军(1988-),男,海南大学2011级硕士研究生,从事水产动物病害与防治研究.E-mail:zgj0106@163.com

通讯作者: 王世锋(1977-),副教授.E-mail:shifeng_15@163.com

收稿日期: 2014-04-14

中图分类号: Q93-331

关键词:

罗非鱼 /

无乳链球菌 /

拮抗菌

摘要: 采用径向扩散法筛选对罗非鱼致病性无乳链球菌具有拮抗作用的益生菌,利用16S r DNA对拮抗菌进行鉴定,构建系统发育树对拮抗菌的多样性进行分析,并通过腹腔注射法测定其对罗非鱼的安全性。结果表明,从8个采样点共分离细菌1 759株,其中59株对无乳链球菌具有较强的拮抗作用,抑菌圈直径为10.6mm³0.8 mm,平均21.9 mm;16S r DNA分子鉴定及系统进化树分析显示,59株拮抗菌分为5属8个种,其中芽孢杆菌属（Bacillus）45株、假单胞菌属（Pseudomonas）5株、肠球菌属（Enterococcus）2株、类芽孢杆菌属（Paenibacillus）2株和葡萄球菌属（Staphylococcus）5株。鱼体安全性试验显示,有22株拮抗菌对罗非鱼不具有致病性,可作为防治罗非鱼无乳链球菌病的备选菌株。

English Abstract

Isolation,Identification and Diversity Analysis of Antagonistic Bacteria Against Tilapia Pathogen Streptococcus agalactiae

1. State Key Laboratory Breeding Base for Sustainable Exploitation of Tropical Bioresources, Hainan University, Haikou 570228;

2. Hainan Provincial Key Laboratory for Tropical Hydrobiology & Biotechnology, College of Marine Sciences, Hainan University, Haikou 570228, China

Received Date: 2014-04-14

Keywords:

Abstract: Antagonistic bacteria against tilapia Streptococcus agalactiae were isolated using Radial Diffusion Assay（ RDA） method and identified using 16 S r DNA sequencing technique. A phylogenetic tree was also constructed to analyze the diversity of the antagonistic bacteria isolated. Intraperitoneal injection method was used to test the toxicity of the isolated antagonistic bacteria against tilapia fishes. Results showed that 59 of the 1 759 strains of the bacteria isolated from eight freshwater ponds showed strong antagonistic effect against Streptococcus agalactiae. The diameter of the inhibition zones ranged from 10. 6 mm to 30. 8 mm with an average value of 21. 9mm.The 16 S r DNA sequencing and phytogenetic tree analysis indicated that these 59 strains of bacteria belong to 5genus and 8 species,including genus Bacillus（ 45 strains）,genus Pseudomonas（ 5 strains）,genus Enterococcus（ 2 strains）,genus Paenibacillus（ 2 stains） and genus Staphylococcus（ 5 strains）. The toxicity tolerance test showed that 22 strains were nontoxic to tilapia fishes. These nontoxic strains can be used as alternative antagonistic bacterial strains to control and prevent from tilapia Streptococcus disease in the future.

引用本文:

Citation:

ZHAO Guangjun, ZHOU Yongcan, YANG Hui, CAI Yan, ZHANG Han, XIE Zhenyu, WANG Shifeng, LI Cong. Isolation,Identification and Diversity Analysis of Antagonistic Bacteria Against Tilapia Pathogen Streptococcus agalactiae[J]. Journal of Tropical Biology, 2014, 5(4): 312-319,356. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2014.04.002

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罗非鱼无乳链球菌拮抗菌的分离、鉴定及多样性分析

DOI: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2014.04.002

第一作者: 赵光军(1988-),男,海南大学2011级硕士研究生,从事水产动物病害与防治研究.E-mail:zgj0106@163.com

通信作者: 王世锋(1977-),副教授.E-mail:shifeng_15@163.com

Isolation,Identification and Diversity Analysis of Antagonistic Bacteria Against Tilapia Pathogen Streptococcus agalactiae

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出版历程

罗非鱼无乳链球菌拮抗菌的分离、鉴定及多样性分析

DOI: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2014.04.002

1. 海南大学海洋学院/热带生物资源可持续利用省部共建国家重点实验室培育基地, 海南海口 570228; 2. 海南大学海洋学院/海南省水生生物技术重点实验室, 海南海口 570228

作者简介: 赵光军(1988-),男,海南大学2011级硕士研究生,从事水产动物病害与防治研究.E-mail:zgj0106@163.com

通讯作者: 王世锋(1977-),副教授.E-mail:shifeng_15@163.com

English Abstract

Isolation,Identification and Diversity Analysis of Antagonistic Bacteria Against Tilapia Pathogen Streptococcus agalactiae

1. State Key Laboratory Breeding Base for Sustainable Exploitation of Tropical Bioresources, Hainan University, Haikou 570228; 2. Hainan Provincial Key Laboratory for Tropical Hydrobiology & Biotechnology, College of Marine Sciences, Hainan University, Haikou 570228, China

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喜报！《热带生物学报（中英文）》影响因子稳步攀升，再创历史新高！

第一作者:
赵光军(1988-),男,海南大学2011级硕士研究生,从事水产动物病害与防治研究.E-mail:zgj0106@163.com

通信作者:
王世锋(1977-),副教授.E-mail:shifeng_15@163.com

1. 海南大学海洋学院/热带生物资源可持续利用省部共建国家重点实验室培育基地, 海南海口 570228;

2. 海南大学海洋学院/海南省水生生物技术重点实验室, 海南海口 570228

作者简介:
赵光军(1988-),男,海南大学2011级硕士研究生,从事水产动物病害与防治研究.E-mail:zgj0106@163.com

1. State Key Laboratory Breeding Base for Sustainable Exploitation of Tropical Bioresources, Hainan University, Haikou 570228;

2. Hainan Provincial Key Laboratory for Tropical Hydrobiology & Biotechnology, College of Marine Sciences, Hainan University, Haikou 570228, China