红树叶蛋白质样品制备方法的比较及其双向电泳分析

彭存智; 李蕾; 刘志昕

doi:10.15886/j.cnki.rdswxb.2010.01.002

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红树叶蛋白质样品制备方法的比较及其双向电泳分析

彭存智, 李蕾, 刘志昕

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彭存智, 李蕾, 刘志昕. 红树叶蛋白质样品制备方法的比较及其双向电泳分析[J]. 热带生物学报（中英文）, 2010, 1(1): 12-16. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2010.01.002

引用本文:

彭存智, 李蕾, 刘志昕. 红树叶蛋白质样品制备方法的比较及其双向电泳分析[J]. 热带生物学报（中英文）, 2010, 1(1): 12-16. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2010.01.002

PENG Cun-zhi, LI Lei, LIU Zhi-xin. Comparison and Analysis of Protein Extraction from Rhizophora apiculata Bl[J]. Journal of Tropical Biology, 2010, 1(1): 12-16. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2010.01.002

Citation:

PENG Cun-zhi, LI Lei, LIU Zhi-xin. Comparison and Analysis of Protein Extraction from Rhizophora apiculata Bl[J]. Journal of Tropical Biology, 2010, 1(1): 12-16. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2010.01.002

红树叶蛋白质样品制备方法的比较及其双向电泳分析

DOI: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2010.01.002

1. 中国热带农业科学院热带生物技术研究所, 农业部转基因植物及植物用微生物环境安全监督检验测试中心, 海南海口 571101;
2. 海南师范大学生命科学学院, 海南海口 571101

基金项目:

中国热带农业科学院中央公益性科研院所基本科研业务费专项支助(ITBBZX083)

详细信息

第一作者:
彭存智（1972－），男，贵州贵阳人，中国热带农业科学院热带生物技术研究所副研究员.

中图分类号: Q816

Comparison and Analysis of Protein Extraction from Rhizophora apiculata Bl

1. Institute of Tropical Bioscience and Biotechnology, Environmental Safety Supervisionand Inspection Centre for Genetically Modified Plants and Microorganisms used in Plants, Ministry of Agriculture, Chinese Academy of Tropical Agricultural Sciences, Haikou 571101 China;
2. Department of Biology, Hainan Normal University; Haikou 571158, China

摘要: 采用水溶液提取法(磷酸盐缓冲液系统)、三氯乙酸-丙酮沉淀法和Phenol改良提取法,对红树叶进行蛋白质提取,并比较分析了这3种方法的蛋白质提取率、完整性、溶解性等。结果表明:水溶液提取法得到的是胶状沉淀,基本为多糖类物质,蛋白质含量很低;三氯乙酸-丙酮沉淀法提取的蛋白质纯度较高,但双向电泳背景最低,提取率较低,蛋白质的完整性差;Phenol改良提取法的蛋白质提取率高,约为三氯乙酸-丙酮法的10倍,双向电泳凝胶背景比三氯乙酸-丙酮沉淀法要深,蛋白质的完整性好,能够被电泳分离的蛋白质点是三氯乙酸-丙酮沉淀法的7倍左右。Phenol改良提取法在蛋白质的提取率以及完整性方面远远高于其他2种蛋白质提取方法。
- 红树 /
- 蛋白质提取 /
- 双向电泳
Abstract: In order to extract high quality protein sample for two dimensional electrophoresis （2-DE） assay,aqueous solution method,trichloroacetic acid-aceton method and the advanced phenol isolated method were used to extract the proteins from Rhizophora apiculata Bl,and the harvest rate,the integrality and the solubility of the three methods were compared and analyzed. The results showed that the colloidal deposition,which was composed of polysaccharide but little of protein,was isolated by the aqueous solution method; the proteins,which were isolated by trichloroacetic acid-aceton method,was purer than that from others and the background in 2-DE was most clearest,but the integrality of protein sample was not enough for 2-DE; 800—1000 μg protein deposition could be harvested from 500 mg leaves material by the advanced phenol isolated method,and the protein spots which were detected on 2-DE gel map were seven times than that by trichloroacetic acid-aceton method. These data demonstrated that the advanced phenol extraction method was more excellent than others based on the great protein harvest ratio and integrality.
- Rhizophora apiculata Bl. /
- protein extraction /
- two-dimensional electrophoresis

[1]	关倩倩, 周致泺, 陈泽蔚, 马优, 杨秋, 刘文杰. 红树林群落对土壤有机碳组分及理化性质的影响 . 热带生物学报（中英文）, 2026, 17(): 1-13. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.20260032
[2]	郑法, 刘伟, 刘嘉慧, 陈泽恒, 翟瑞浩, 王宁, 韦秀. 海南陵水新村港红树林现状和修复策略探析 . 热带生物学报（中英文）, 2024, 15(6): 770-779. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.20230129
[3]	刘文娟, 陈新, 李建聪, 李思萍, 陈英洁, 唐敏. 海南红树林沉积中硫酸盐还原菌群落的特征 . 热带生物学报（中英文）, 2023, 14(1): 120-128. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2023.01.011
[4]	张小海, 罗理想, 陈泽恒, 卢刚, 黄福林, 黎方毅, 翟瑞浩. 海南新盈红树林国家湿地公园鸟类多样性研究 . 热带生物学报（中英文）, 2023, 14(2): 189-195. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2023.02.008
[5]	张悦, 陈燕丽, 黄滢, 许文龙, 陶艳成, 刘文爱. 防城港 2 种红树林虫害与气象条件的关系 . 热带生物学报（中英文）, 2022, 13(6): 634-643. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2022.06.014
[6]	邓雅洁, 刘云豪, 孙琪, 邱越, 宋家明, 赖杭桂. 在干旱胁迫下有性四倍体木薯叶片的蛋白质组学研究 . 热带生物学报（中英文）, 2021, 12(2): 210-218. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2021.02.010
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[14]	孙勇, 王丹, 仝征, 常丽丽, 王力敏, 王旭初. 植物糖基化蛋白质组研究技术策略及研究进展 . 热带生物学报（中英文）, 2016, 7(3): 402-408. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2016.03.022
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[16]	张霖, 刘进平. 巴西橡胶树死皮病相关基因与蛋白质研究进展 . 热带生物学报（中英文）, 2015, 6(3): 347-352. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2015.03.021
[17]	杨暄, 李俊, 李从发, 郝俊冉, 许文涛, 刘四新. 细菌纤维素产生菌双向凝胶电泳分析技术 . 热带生物学报（中英文）, 2014, 5(1): 73-77,91. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2014.01.003
[18]	臧剑, 符秀梅, 王鹤鸣, 林道哲, 吴辉, 陈健妙, 陈银华. 角果木根系盐胁迫的防御机理 . 热带生物学报（中英文）, 2013, 4(2): 160-164. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2013.02.002
[19]	冯尔辉, 陈伟, 廖宝文, 李华亮, 陈玉军, 黄勃. 海南东寨港红树林湿地鸟类监测与研究 . 热带生物学报（中英文）, 2012, 3(1): 73-77. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2012.01.003
[20]	陈玉军, 廖宝文, 黄勃, 张乔民, 徐大平, 陈元海, 林卫海. 红树林消波效应研究进展 . 热带生物学报（中英文）, 2011, 2(4): 378-382. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2011.04.018

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红树叶蛋白质样品制备方法的比较及其双向电泳分析

DOI: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2010.01.002

1. 中国热带农业科学院热带生物技术研究所, 农业部转基因植物及植物用微生物环境安全监督检验测试中心, 海南海口 571101;

2. 海南师范大学生命科学学院, 海南海口 571101

基金项目:

中国热带农业科学院中央公益性科研院所基本科研业务费专项支助(ITBBZX083)

作者简介:
彭存智（1972－），男，贵州贵阳人，中国热带农业科学院热带生物技术研究所副研究员.

收稿日期: 2009-06-18

中图分类号: Q816

关键词:

红树 /

蛋白质提取 /

双向电泳

摘要: 采用水溶液提取法(磷酸盐缓冲液系统)、三氯乙酸-丙酮沉淀法和Phenol改良提取法,对红树叶进行蛋白质提取,并比较分析了这3种方法的蛋白质提取率、完整性、溶解性等。结果表明:水溶液提取法得到的是胶状沉淀,基本为多糖类物质,蛋白质含量很低;三氯乙酸-丙酮沉淀法提取的蛋白质纯度较高,但双向电泳背景最低,提取率较低,蛋白质的完整性差;Phenol改良提取法的蛋白质提取率高,约为三氯乙酸-丙酮法的10倍,双向电泳凝胶背景比三氯乙酸-丙酮沉淀法要深,蛋白质的完整性好,能够被电泳分离的蛋白质点是三氯乙酸-丙酮沉淀法的7倍左右。Phenol改良提取法在蛋白质的提取率以及完整性方面远远高于其他2种蛋白质提取方法。

English Abstract

Comparison and Analysis of Protein Extraction from Rhizophora apiculata Bl

1. Institute of Tropical Bioscience and Biotechnology, Environmental Safety Supervisionand Inspection Centre for Genetically Modified Plants and Microorganisms used in Plants, Ministry of Agriculture, Chinese Academy of Tropical Agricultural Sciences, Haikou 571101 China;

2. Department of Biology, Hainan Normal University; Haikou 571158, China

Received Date: 2009-06-18

Keywords:

Abstract: In order to extract high quality protein sample for two dimensional electrophoresis （2-DE） assay,aqueous solution method,trichloroacetic acid-aceton method and the advanced phenol isolated method were used to extract the proteins from Rhizophora apiculata Bl,and the harvest rate,the integrality and the solubility of the three methods were compared and analyzed. The results showed that the colloidal deposition,which was composed of polysaccharide but little of protein,was isolated by the aqueous solution method; the proteins,which were isolated by trichloroacetic acid-aceton method,was purer than that from others and the background in 2-DE was most clearest,but the integrality of protein sample was not enough for 2-DE; 800—1000 μg protein deposition could be harvested from 500 mg leaves material by the advanced phenol isolated method,and the protein spots which were detected on 2-DE gel map were seven times than that by trichloroacetic acid-aceton method. These data demonstrated that the advanced phenol extraction method was more excellent than others based on the great protein harvest ratio and integrality.

彭存智, 李蕾, 刘志昕. 红树叶蛋白质样品制备方法的比较及其双向电泳分析[J]. 热带生物学报（中英文）, 2010, 1(1): 12-16. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2010.01.002

引用本文:

彭存智, 李蕾, 刘志昕. 红树叶蛋白质样品制备方法的比较及其双向电泳分析[J]. 热带生物学报（中英文）, 2010, 1(1): 12-16. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2010.01.002

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红树叶蛋白质样品制备方法的比较及其双向电泳分析

DOI: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2010.01.002

第一作者: 彭存智（1972－），男，贵州贵阳人，中国热带农业科学院热带生物技术研究所副研究员.

Comparison and Analysis of Protein Extraction from Rhizophora apiculata Bl

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出版历程

红树叶蛋白质样品制备方法的比较及其双向电泳分析

DOI: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2010.01.002

1. 中国热带农业科学院 热带生物技术研究所, 农业部转基因植物及植物用微生物环境安全监督检验测试中心, 海南 海口 571101; 2. 海南师范大学 生命科学学院, 海南 海口 571101

作者简介: 彭存智（1972－），男，贵州贵阳人，中国热带农业科学院热带生物技术研究所副研究员.

English Abstract

Comparison and Analysis of Protein Extraction from Rhizophora apiculata Bl

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喜报！《热带生物学报（中英文）》影响因子稳步攀升，再创历史新高！

第一作者:
彭存智（1972－），男，贵州贵阳人，中国热带农业科学院热带生物技术研究所副研究员.

1. 中国热带农业科学院热带生物技术研究所, 农业部转基因植物及植物用微生物环境安全监督检验测试中心, 海南海口 571101;

2. 海南师范大学生命科学学院, 海南海口 571101

作者简介:
彭存智（1972－），男，贵州贵阳人，中国热带农业科学院热带生物技术研究所副研究员.