本试验材料为来自国内外的27份海雀稗种质资源（表1），其中20份从美国引进，7份来自海南，现保存于海南大学儋州校区农科基地。试验材料按序号顺序分别种植在1 m × 1 m的小区内，每2周对小区边缘进行1次修剪，以防止不同材料间的混淆。进行常规灌溉和施肥，以保持材料的健康生长。

随机选取3份田间坪用质量较好的海雀稗材料（USA17-35，USA17-47和Seaspray），从试验地取大小、生长一致的匍匐茎，种植于装好石英砂的塑料杯中。在塑料杯杯底垫1块大小合适的纱布，以防止石英砂外漏。参照MARCUM等^[15]及陈静波等^[16]的试验方法，采用水培法对海雀稗材料进行预培养，每周换营养液并进行修剪。参照钟小仙等^[17]的方法，设置0（对照），5，10，15，20，25和30 g·L⁻¹ NaCl共7个浓度。修剪一致后开始进行盐处理，处理28 d后，采用目测打分法记录坪用质量、叶片枯黄率和叶色。

利用筛选出的盐浓度（25 g·L⁻¹ NaCl），对27份海雀稗种质资源进行耐盐性评价。选取健康的匍匐茎，水培法预培养3个月左右，修剪后，开始盐处理，以不加NaCl作为对照。为防止高浓度盐冲击，以每天5 g·L⁻¹ NaCl的浓度逐渐增加。第5天时，达到预期的25 g·L⁻¹ NaCl浓度。盐处理28 d后，采用目测打分法记录叶片枯黄率和坪用质量。然后对极端耐盐材料测定钠、钾离子含量。

测定指标参考廖丽等^[18]和GUO等^[19]的方法，具体测定方法如下：（1）坪用质量：采用目测法，参照NTEP（The National Turfgrass Evaluation Program，美国国家草坪评比项目）标准，以草坪的密度、质地、颜色、均一性等为指标进行综合评分，坪用质量最高为9分，6分为可以接受的草坪质量，1分为草坪死亡。3人打分求平均值。

相对坪用质量=（处理坪用质量/对照坪用质量）×100%。

（2）枯黄率：采用目测法记录枯黄叶片面积占总面积的百分比。3人打分求平均值。

（3）叶色：采用目测法记录不同材料的叶色，重复3次并求平均值。采用9分级，分别为蓝绿（9分）、深绿（7分）、绿（5分）、浅绿（3分）、黄绿（1分）。

（4）钠、钾离子含量：采用微波消解法和火焰光度计测量海雀稗地上、地下部分的Na^＋，K^＋含量。

采用Excel软件和SPSS 20.0软件进行数据整理及分析。

不同NaCl浓度处理之间，海雀稗生长差异明显（图1）。随着NaCl浓度的增加，海雀稗生长呈现出枯黄率增加，叶色逐渐变浅，坪用质量随之降低。对照条件下，海雀稗生长状况良好，颜色健康；低浓度（5 g·L⁻¹ NaCl）促进了海雀稗的生长；（10～20） g·L⁻¹ NaCl处理的海雀稗生长受到抑制，但是坪用质量较好；高浓度（25，30 g·L⁻¹ NaCl）抑制了其生长，25 g·L⁻¹ NaCl处理下海雀稗植株就会出现50%以上的枯黄，叶色变得很浅，叶片也因盐胁迫而卷曲，尤其是NaCl浓度在30 g·L⁻¹时，植株受到严重胁迫，大部分叶片已经死亡，存活的叶片也渐渐变黄。

图  1  不同浓度NaCl处理对海雀稗（USA17-47）的影响

Figure 1.  Effects of different NaCl concentrations on P. vaginatum accession USA17-47

在盐胁迫下，随着NaCl浓度的增加，海雀稗坪用质量呈现逐渐下降趋势（表2）。低浓度（5，10 g·L⁻¹ NaCl）处理坪用质量较好，与对照无显著差异，而与高浓度（25，30 g·L⁻¹ NaCl）处理间差异显著（P<0.05）。（0～15） g·L⁻¹ NaCl各处理间和（20～30） g·L⁻¹ NaCl各处理间无显著差异（P>0.05）。低浓度（5，10 g·L⁻¹ NaCl）处理下，海雀稗坪用质量在6分左右，但在高浓度（25，30 g·L⁻¹ NaCl）处理下，海雀稗坪用质量低于4分，均显著低于对照处理（P<0.05）。

不同NaCl浓度处理对海雀稗枯黄率的影响较大，各处理之间显著差异（P<0.05）（表2）。低浓度（5 g·L⁻¹ NaCl）处理下，海雀稗的枯黄率较低，在10%左右，与对照无显著性差异（P>0.05），而中等、高浓度（15～30 g·L⁻¹ NaCl）各处理枯黄率与对照处理存在显著差异（P<0.05）。中等浓度（10～20 g·L⁻¹ NaCl）与高浓度（25，30 g·L⁻¹ NaCl）处理之间也存在着显著差异（P<0.05），（0～20） g·L⁻¹ NaCl处理间，叶片枯黄率基本低于40%，但在高浓度（25，30 g·L⁻¹ NaCl）处理时，海雀稗的枯黄率在50%以上。

海雀稗的叶色随着NaCl浓度的增加呈现由深变浅的趋势（图1，表2）。在低浓度（5，10 g·L⁻¹ NaCl）处理下，海雀稗叶色较深，与对照无显著性差异（P>0.05），而与中等、高浓度（15～30 g·L⁻¹ NaCl）处理之间有显著差异（P<0.05）。中等浓度（15，20 g·L⁻¹ NaCl）处理，海雀稗叶色相对于对照颜色较浅，与高浓度（25，30 g·L⁻¹ NaCl）处理的也有一些差异。高浓度（25，30 g·L⁻¹ NaCl）处理，叶色下降更多，显著低于对照（P<0.05）。5 g·L⁻¹ NaCl处理，叶色大致在7分，具有良好的视觉效果；而在10，15 g·L⁻¹ NaCl处理下，叶色仅有5分左右；25，30 g·L⁻¹ NaCl处理，叶色均低于4分，视觉效果显著下降。

各指标间均达到极显著相关（P<0.01）（表3）。其中坪用质量与枯黄率之间呈极显著负相关（r=−0.787）；坪用质量与叶色间呈极显著正相关（r=0.847）；枯黄率与叶色呈极显著负相关（r=−0.917）。

分别以海雀稗不同NaCl浓度处理的枯黄率为自变量，NaCl处理浓度作为因变量，建立回归方程，分别求得线性回归方程USA17-35：Y＝0.678 8X−0.002 7X²−4.301 2，R²＝0.980 6；USA17-47：Y＝0.967 3X−0.007 4X²−2.825 8，R²＝0.965 9；Seaspray：Y＝0.837 5X−0.005 5X²−2.166 2，R²＝0.957 6。参照徐毓皎等^[20]的方法，以叶片枯黄率为50%的NaCl浓度作为海雀稗的临界盐处理浓度，得出海雀稗具有50%存活的临界盐处理浓度分别为22.89，27.04和25.96 g·L⁻¹，平均为25.30 g·L⁻¹。为了操作方便，本研究中选取的最适盐处理浓度为25 g·L⁻¹。

以相对坪用质量和枯黄率为主要测定指标，利用25 g·L⁻¹ NaCl对27份海雀稗种质资源进行耐盐评价，如图2，3所示，海雀稗不同种质资源之间的相对坪用质量无显著差异，枯黄率存在明显差异。盐处理下，海雀稗的耐盐性因材料不同而不同。USA17-18，HN17-18，HN17-13，USA17-01和HN7-29的相对坪用质量都在0.80左右，表明这些海雀稗材料的耐盐性较好；USA17-19，HN17-42，USA17-30，USA17-35和USA17-26的相对坪用质量均在0.65左右，说明这些海雀稗材料的耐盐性较差（图2）。USA17-18，Seaspray，USA17-02和HN17-18的枯黄率均小于40%，说明它们受盐处理的影响相对较小；而USA17-24，USA17-19，USA17-30和USA17-26的枯黄率均大于70%，说明它们的生长受盐处理的影响较为严重。相对坪用质量和枯黄率2个指标综合分析，发现USA17-18的相对坪用质量较高，枯黄率较低；USA17-26的相对坪用质量较低，枯黄率较高，因此筛选出极端耐盐种质：USA17-18（耐盐）和USA17-26（敏盐）（图4）。

图  2  盐处理对不同海雀稗种质资源相对坪用质量的影响

Figure 2.  Effects of salt tolerance on the relative turf quality of different accessions of P. vaginatum

图  3  盐处理对不同海雀稗种质资源枯黄率的影响

Figure 3.  Effects of salt tolerance on the leaf firing of different accessions of P. vaginatum

图  4  海雀稗耐盐极端种质比较

Figure 4.  Comparison of P. vaginatum accessions very highly or less tolerant to salt

对海雀稗耐盐极端材料的钠钾离子含量进行测定，发现盐胁迫后，地上和地下Na⁺含量均显著增加，但K⁺含量和K/Na值都显著下降（图5，6，7）。耐盐材料（USA17-18，HN17-18和USA17-1）的Na⁺含量比敏盐材料（USA17-19、USA17-30和USA17-26）低；耐盐材料的K⁺含量比敏盐材料高；而K/Na值无显著变化。减少Na⁺的摄入，维持较高的K⁺含量，可能是海雀稗耐盐的机制。

图  5  海雀稗耐盐极端材料的Na⁺含量

Figure 5.  Na⁺ contents of P. vaginatum accessions very highly or less tolerant to salt

图  6  海雀稗耐盐极端材料的K⁺含量

Figure 6.  K⁺ contents of P. vaginatum accessions very highly or less tolerant to salt

图  7  海雀稗耐盐极端材料的K/Na值

Figure 7.  K/Na value of P. vaginatum accessions very highly or less tolerant to salt

土壤盐碱化严重降低了作物的生产力，开发盐碱地是农业生产将面临的重大难题。种植耐盐性较强的植物被认为是最为经济高效的盐碱地改良的方法^[21]。草坪草在生长过程中，受到盐胁迫，生长速度减慢，生物量降低。而且高盐胁迫下，叶片枯黄增加，甚至叶片边缘出现灼烧现象，从而降低了坪用质量^[20]。很多暖季型草坪草都比较耐盐^{[12-13,15, 22-23]}，比如海雀稗、沟叶结缕草、结缕草等，被认为是盐生植物^[24]。许多学者对暖季型草坪草的耐盐能力进行了研究。MARCUM^[12]发现6种草坪草的耐盐能力依次为海雀稗>沟叶结缕草>钝叶草>狗牙根>结缕草>假俭草。陈静波等^{[4, 25]}也报道过暖季型草坪草中，海雀稗的抗NaCl能力较强。

坪用质量、叶片枯黄率和叶色是评价草坪草耐盐性的常用指标^[26]。目前利用这3个指标对草坪草盐胁迫的响应进行了大量研究^{[5, 17, 25, 27]}。本研究选取了坪用质量、枯黄率和叶色这3个指标进行海雀稗耐盐体系优化。结果表明，在盐胁迫下，海雀稗种质资源的生长响应表现为叶片枯黄率增加，坪用质量下降，生长受到抑制。在本研究中，当NaCl浓度不断增加时，叶片枯黄率随之增加，坪用质量随之降低，叶色也逐渐变浅，与GUO等^[19]的研究结果一致。但是在5 g·L⁻¹ NaCl处理时，对海雀稗的生长有促进作用，当NaCl浓度提高到10 g·L⁻¹时，海雀稗生长开始受到抑制，与陈静波等^[25]的研究结果一致。本研究中海雀稗叶色随着NaCl浓度增加而显著下降，高浓度（25，30 g·L⁻¹）NaCl处理，叶片卷曲且出现50%以上的枯黄，尤其是在30 g·L⁻¹时植株受到严重胁迫，大部分叶片已经死亡，存活的叶片也渐渐变黄，此结果与竹节草^[28]和钝叶草^[20]耐盐性的研究结果相似。相关性分析结果可知，坪用质量与枯黄率之间呈极显著负相关（P<0.01），说明盐处理下枯黄率的增加影响了坪用质量的变化，与廖丽等^[29]的研究结果一致。徐毓皎等^[20]对钝叶草盐胁迫半致死浓度筛选中确定了50%枯黄率时的NaCl浓度为临界浓度。本研究通过建立回归方程，确定了海雀稗最适盐处理浓度为25 g·L⁻¹。

本研究利用25 g·L⁻¹ NaCl对27份海雀稗种质资源进行耐盐性评价时，发现海雀稗不同种质资源之间的枯黄率存在明显差异，其耐盐性因品种不同而异，这与GUO等^[19]的研究结果一致。本研究在测定钠钾离子含量时，发现盐处理后地上和地下Na⁺含量均显著增加，但K⁺含量和K/Na值都显著下降，说明海雀稗受到盐处理后Na⁺抑制K⁺的吸收，与LEE等^[30]和李珊^[31]的研究结果一致。本研究还发现耐盐材料的Na⁺含量比敏盐材料低；耐盐材料的K⁺含量比敏盐材料高。所以减少Na⁺的摄入，维持较高的K⁺含量，可能是海雀稗耐盐的机制。本研究结果为优质耐盐海雀稗品种的选育提供理论依据，也为盐碱化土壤的改良奠定了基础。