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股骨头缺血性坏死或无菌性坏死,又称累-卡-佩斯病(Legg-Calvé-Perthes Disease,LCPD),此病常见于约克夏犬(Yorkshire terrier)、腊肠犬(Dachshund)、吉娃娃犬(Chihuahua)、贵宾犬(Poodle)等小型犬种,其中6~10月龄犬只高发 [1];此病发病的主要原因是血供破坏,但主要发病机制目前还不清楚,主要的病理过程是以股骨头部分或完全性缺血和成骨细胞凋亡坏死,骨小梁萎缩,进而导致股骨头塌陷、形变。在人类临床上,LCPD是常见又难以治愈的骨科疾病,尚没有公认的根本治愈的方法[2],其治疗一般会根据不同发展阶段采用相适应的治疗方法,其早中期的治疗一般采用双膦酸盐类药物保守治疗或实施髓蕊减压术、钽棒植入支撑、富血小板血浆(platelet rich plasma, PRP)等保髋治疗,后期则采用全髋置换术(Total hip replacement,THR)。但临床上,对于犬 LCPD保髋治疗的方法研究甚少,去髋疗法股骨头和股骨颈切除术( femoral head and neck excision,FHNE)及THR仍然是该病普遍采用的治疗方法。
双磷酸盐对骨代谢的作用首次报道于1968年[3],目前已经出了第三代药,比如依替磷酸盐、阿伦磷酸盐,第三代药无论是活性还是抗骨吸收能力还是治疗范围都比前两代更强,甚至比第一代活性强几万倍[4]。由于双膦酸盐类药物能够抑制破骨细胞活性加速其凋亡,预防骨质吸收,同时又能防止成骨细胞凋亡,增加新骨形成在人类临床上被广泛应用于骨质疏松、恶性肿瘤骨转移、早期LCPD的治疗;富血小板血浆(platelet rich plasma, PRP)由于其富含具有促进成骨细胞增殖和分化、抑制破骨细胞对骨吸收等功能的同源性生长因子(growth factors, GFs),被广泛应用于治疗股骨头缺血性坏死(avascular necrosis of femoral head, ANFH)[5-8],但在兽医临床上双膦酸盐类药物及PRP对犬LCPD的研究甚少。本试验研究阿仑膦酸钠及PRP治疗LCPD模型犬的效果,为临床治疗缺血性股骨头坏死提供新途径。
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建模前、后X线扫描对比(图1、图2)。在12只犬中,9 只犬DR影像不同程度地出现骨密度不均匀、囊性变、股骨头形态轻微改变等异常变化,其中1、8、12号犬股骨头DR影像无明显变化。
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外科解剖无DR影像学变化的犬股骨头,外观形态结果见图3。图3可见,1号犬股骨头关节面出现瘀斑,8、12号犬关节面出现不同程度的软骨磨损和塌陷。
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建模12只犬中,8只犬在Ficat分期体系中属于I期,1只犬属于II期,3只犬为0期,结果成功建立12只犬 0~II期LCPD模型(表1)。
表 1 建模后Ficat分期评估表
分期评估 试验犬编号 分期 症状 0 期 无疼痛、X线无异常 1、8、12 I期 骨密度不均匀 2、3、4、5、7、9、11 Ⅱ 期 骨硬化、囊性病变 6 过渡期 软骨下骨折( 新月征) 及
股骨头局灶性变扁Ⅲ期 新月征、股骨头塌陷 Ⅳ期 股骨头扁平、畸形、
骨赘生成、关节间隙变窄 -
A组治疗前、后股骨头X线片检查结果(图4)可见,5号犬X线片显示较治疗前股骨头骨密度不均匀得到改善,但关节间隙变窄;6号犬患肢髋关节X线片与治疗前X线片对比囊性病变缩小,髋臼窝与股骨头界限清晰;9号犬只患肢髋关节X线片与治疗前X线片对比形态更为光滑,骨密度更均匀,髋臼窝与股骨头界限更为清晰。B组治疗前、后股骨头X线片检查结果(图5)可见,2号犬患肢X线片较治疗前,髋臼窝与股骨头界限更为清晰,关节间隙无差异;3号犬患肢较治疗前囊性病变减轻,髋臼窝与股骨头界限清晰;4号犬骨密度不均匀,治疗后无明显改善,关节界限不清,无其他异常。C组治疗前、后股骨头X线片检查结果(图6)可见,7号犬患肢X线片较治疗前股骨头密度变得不均匀,下骨塌陷形成新月征;10号犬股骨头骨密度不均匀与治疗前无差异;11号犬股骨颈出现囊性病变,股骨头形状发生改变。9只犬治疗后X线片对比结果见图7。
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如图8和表2所示,经治疗后A组(阿伦磷酸钠组)5号犬溃疡状软骨塌陷,其他犬只股骨头均光滑无塌陷。B组(PRP组)3只犬股骨头表面光滑无异常。C组对照组10号犬出现沟渠状软骨塌陷,7、11号犬出现环形软骨塌陷。
表 2 治疗试验股骨头解剖症状评估表
试验组 试验犬编号 解剖症状 股骨头表面光滑无塌陷或瘀斑 股骨头软骨面磨损 股骨头塌陷 股骨头扁平、畸形、骨赘生成 A组 5号 ● 6号 ● 9号 ● B组 2号 ● 3号 ● 4号 ● C组 7号 ● 10号 ● 11号 ● -
治疗后A组中,5、9号犬从I期变为0期,6号仍是I期;B组2号犬从I期变为0期,3、4号仍是I期;C组7号犬从I期变为过渡期,10号犬从I期变为III期,11号犬从I期变为Ⅳ期(表3)。
表 3 治疗效果 Ficat分期评估表
试验组 试验犬
编号时期 0期 I期 II期 过渡期 III期 IV期 A组 5号 ● √ 6号 √ ● 9号 ● √ B组 2号 ● √ 3号 √ ● 4号 √ ● C组 7号 √ ● 10号 √ ● ● 11号 √ ● ● 注:“√”表示治疗前症状,“●”表示治疗后症状。0期:股骨头症状为无疼痛、X线无异常;I期:骨密度不均匀;II期:骨硬化、囊性病变;过渡期:软骨下骨折( 新月征) 及股骨头局灶性变扁;Ⅲ期:新月征、股骨头塌陷;IV期:扁平、畸形、骨赘生成、关节间隙变窄。 -
3 组试验动物治疗后X线片影像结果Ficat分期分析依据为比治疗前好或无差异及股骨头解剖未出现股骨头塌陷或者形变则认为治疗有效,否则为无效。数据分析结果(表4)表明,A组2只动物治疗有效,B组3只动物治疗有效,C组3只动物病情逐渐加重,软骨严重塌陷,治疗无效。
表 4 A、B、C组治疗有效性组间差异性的分析
组 间 均值差 标准误 显著性 95%置信区间 下限 上限 A组 B组 0.333 0.272 0.267 −0.33 1.00 C组 −0.667* 0.227 0.05 −1.33 0.00 B组 A组 −0.333* 0.227 0.267 −1.00 0.33 C组 −1.000* 0.227 0.01 −1.67 −0.33 C组 A组 0.667* 0.227 0.05 0.00 1.33 B组 1.000* 0.227 0.01 0.33 1.67 注:差异为显著P≤0.5,差异为极显著P≤0.01。 统计差异分析结果表明(表4),A组与B组差异不显著,B组与C组差异极显著,A与C组差异显著。
Experimental study of alendronate sodium and platelet rich plasma in the treatment of canine Legg-Calvé-Perthes disease
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摘要: 为了比较阿仑膦酸钠和富血小板血浆(Platelet rich plasma,PRP)对犬累-卡-佩斯病(LCPD)治疗效果,选取12只6月龄体质量相近的犬,应用液氮建模法建立LCPD模型,运用X线片及Ficat and Arlet classification(Ficat) 分期体系对建模结果进行分期和评估。根据股骨头坏死临床诊断标准,选取股骨头坏死Ⅰ~Ⅱ期阶段的9只犬随机分成A、B、C 3组,A组以每周3 mg·kg−1剂量口服给药阿伦磷酸钠治疗12周;B组每两周以1 mL葡萄糖酸钙活化的富血小板血浆进行关节腔注射治疗,共注射3次;C组作为空白对照组,不采取治疗措施。3个月后,通过X线扫描及解剖患肢股骨头评估治疗效果,如X影像未出现Ⅲ、Ⅳ期病变特征及解剖结果出现股骨头表面光滑无塌陷则认为治疗有效,否则为无效,并运用SPSS Statistics 17.0软件包进行数据统计分析评估治疗效果。结果显示,A组2只犬治疗有效,1只无效。B组3只均有效,C组3只无效。A组与C组差异显著(P=0.05),A组与B组差异不显著(P=0.267),B组与C组差异极其显著(P=0.01),表明,阿仑膦酸钠和PRP均能有效治疗犬LCPD病,但阿仑膦酸钠与PRP治疗效果无显著性差异。Abstract: An attempt was made to study the therapeutic effect of alendronate sodium and platelet-rich plasma (PRP) on canine Legg-Calvé-Perthes disease (LCPD) to provide a new way for the clinical treatment of avascular necrosis of canine femoral head. Twelve 6-month-old dogs with similar body weight were selected to establish the LCPD model by liquid nitrogen freezing, and the modeling results were evaluated and staged by X-ray film and Ficat-Arlet classification system. According to the clinical diagnostic criteria, nine dogs with the stages Ⅰ−Ⅱ of avascular necrosis of the femoral head were randomly divided into three groups, A, B and C. Group A was treated with alendronate sodium orally; Group B received intra-articular injection of calcium gluconate activated platelet rich plasma; Group C served as a control group without any treatment. Three months after treatment, X-ray films were taken and the femoral head of the affected limb was dissected to evaluate the therapeutic effect. If the X-ray film shows no phase Ⅲ and Ⅳ pathological features and anatomical results, and the surface of the femoral head is smooth without collapse, it is considered that the treatment is effective, otherwise it is ineffective. The results showed that the two dogs in Group A had effective treatment while one did not have effective treatment. All the three dogs in Group B were treated effectively, and the three dogs in Group C were not effectively treated. This indicated that both alendronate sodium and PRP can effectively treat canine LCPD, but there was no significant difference in treatment effect between alendronate sodium and PRP (P=0.267).
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表 1 建模后Ficat分期评估表
分期评估 试验犬编号 分期 症状 0 期 无疼痛、X线无异常 1、8、12 I期 骨密度不均匀 2、3、4、5、7、9、11 Ⅱ 期 骨硬化、囊性病变 6 过渡期 软骨下骨折( 新月征) 及
股骨头局灶性变扁Ⅲ期 新月征、股骨头塌陷 Ⅳ期 股骨头扁平、畸形、
骨赘生成、关节间隙变窄表 2 治疗试验股骨头解剖症状评估表
试验组 试验犬编号 解剖症状 股骨头表面光滑无塌陷或瘀斑 股骨头软骨面磨损 股骨头塌陷 股骨头扁平、畸形、骨赘生成 A组 5号 ● 6号 ● 9号 ● B组 2号 ● 3号 ● 4号 ● C组 7号 ● 10号 ● 11号 ● 表 3 治疗效果 Ficat分期评估表
试验组 试验犬
编号时期 0期 I期 II期 过渡期 III期 IV期 A组 5号 ● √ 6号 √ ● 9号 ● √ B组 2号 ● √ 3号 √ ● 4号 √ ● C组 7号 √ ● 10号 √ ● ● 11号 √ ● ● 注:“√”表示治疗前症状,“●”表示治疗后症状。0期:股骨头症状为无疼痛、X线无异常;I期:骨密度不均匀;II期:骨硬化、囊性病变;过渡期:软骨下骨折( 新月征) 及股骨头局灶性变扁;Ⅲ期:新月征、股骨头塌陷;IV期:扁平、畸形、骨赘生成、关节间隙变窄。 表 4 A、B、C组治疗有效性组间差异性的分析
组 间 均值差 标准误 显著性 95%置信区间 下限 上限 A组 B组 0.333 0.272 0.267 −0.33 1.00 C组 −0.667* 0.227 0.05 −1.33 0.00 B组 A组 −0.333* 0.227 0.267 −1.00 0.33 C组 −1.000* 0.227 0.01 −1.67 −0.33 C组 A组 0.667* 0.227 0.05 0.00 1.33 B组 1.000* 0.227 0.01 0.33 1.67 注:差异为显著P≤0.5,差异为极显著P≤0.01。 -
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