巴西橡胶树胶乳酵母双杂交cDNA表达文库的构建及分析

《中国科技核心期刊》数据库收录期刊
《中国学术期刊（光盘版）》全文收录期刊
《中文科技期刊数据库》收录期刊
《美国乌利希国际期刊指南（Ulrichsweb）》数据库收录期刊

高级检索

留言板

尊敬的读者、作者、审稿人, 关于本刊的投稿、审稿、编辑和出版的任何问题, 您可以本页添加留言。我们将尽快给您答复。谢谢您的支持!

姓名
邮箱
手机号码
标题
留言内容
验证码

巴西橡胶树胶乳酵母双杂交cDNA表达文库的构建及分析

杨子平, 李辉亮, 郭冬, 彭世清

文章导航 > 热带生物学报 > 2013 > 4(4): 303-307

杨子平, 李辉亮, 郭冬, 彭世清. 巴西橡胶树胶乳酵母双杂交cDNA表达文库的构建及分析[J]. 热带生物学报, 2013, 4(4): 303-307. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2013.04.001

引用本文:

杨子平, 李辉亮, 郭冬, 彭世清. 巴西橡胶树胶乳酵母双杂交cDNA表达文库的构建及分析[J]. 热带生物学报, 2013, 4(4): 303-307. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2013.04.001

YANG Ziping, LI Huiliang, GUO Dong, PENG Shiqing. Construction and Analysis of Latex cDNA Library for A Yeast Two-hybrid Library[J]. Journal of Tropical Biology, 2013, 4(4): 303-307. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2013.04.001

Citation:

YANG Ziping, LI Huiliang, GUO Dong, PENG Shiqing. Construction and Analysis of Latex cDNA Library for A Yeast Two-hybrid Library[J]. Journal of Tropical Biology, 2013, 4(4): 303-307. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2013.04.001

巴西橡胶树胶乳酵母双杂交cDNA表达文库的构建及分析

doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2013.04.001

杨子平^1,2,
李辉亮²,
郭冬²,
彭世清^2, ,

1. 海南大学农学院, 海南海口 570228;
2. 中国热带农业科学院热带生物技术研究所/农业部热带作物生物学与遗传资源利用重点实验室, 海南海口 571101

基金项目:

中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金资助项目(ITBB110205)

国家自然科学基金项目(31170634)

第一作者:
杨子平(1984-),男,湖南衡阳人,海南大学2012级在读博士研究生。研究方向:植物分子生物学.

通信作者:
彭世清,E-mail:shqpeng@163.com

中图分类号: Q782

Construction and Analysis of Latex cDNA Library for A Yeast Two-hybrid Library

1. College of Agronomy, Hainan University, Haikou 570228, China;
2. Ministry of Agriculture Key Laboratory of Biology and Genetic Resources of Tropical Crops/Institute of Tropical Bioscience and Biotechnology, Chinese Academy of Tropical Agricultural Sciences, Haikou 571101, China

摘要: 提取巴西橡胶树胶乳总RNA,并纯化mRNA。采用特异引物(oligo-dT)反转出第一链DNA,经LDPCR合成第二链DNA。将ds cDNA和经SmaⅠ线性化的pGADT7-Rec质粒共转化Y187酵母菌,构建酵母双杂交cDNA表达文库。结果表明,转化单菌落个数为2.8×10⁷;文库滴度为4.92×10⁷·mL^-1;插入片段大小主要分布于500～2 000 bp间;重组率为96%。实验数据表明该文库能满足后续的杂交筛选。
- 橡胶树 /
- 酵母双杂交 /
- cDNA文库
Abstract: Total RNA was extracted from laticifers of Hevea brasiliensis,and total RNA was used to purify mRNA with MACHERY-NAGEL Purification of poly（ A） RNA kit. The first strand cDNA was synthesized by reverse transcription of mRNA with SMART oligo-dT technique,and LD-PCR was performed to synthesize double strand cDNA. The double strand cDNA was then purified by running through a CHROMA SPIN^TM TE-400 column of clontech to select with ds cDNA molecules ＞ 200 bp. Purified ds cDNA and lineared pGADT7-Rec were cotransformed into Y187 yeast strain to construct a yeast two-hybrid cDNA library of Hevea brasiliensis laticifers. The detection showed that the library contained 2. 8 × 10⁷ independent clones,and that the titer of library was 4. 92 × 10⁷·mL^-1. The sizes of most inserts ranged from 500 to 2 000 bp in this library,and the recombination rate was 96%. These results showed that the library was suitable for yeast mating and can be used to screen interaction proteins.
- Hevea brasiliensis /
- yeast two-hybrid /
- cDNA library

[1]	王梦月, 康立, 赵平娟, 谢贵水, 刘钊, 张盈盈, 刘子凡, 安锋. 割面铝处理对橡胶树胶乳产量及生理参数的影响 . 热带生物学报, 2025, 16(): 1-10. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.20240185
[2]	吴竞远, 唐璐芝, 朱彬彬, 赵惠萍. 木薯生长素响应因子MeARF的克隆及互作蛋白的筛选 . 热带生物学报, 2025, 16(): 1-9. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.20240148
[3]	刘梓权, 朱家红, 王颖, 李辉亮, 李玉姬, 唐燕琼, 郭冬. 橡胶树HbbZIP74基因的表达分析及蛋白原核表达纯化 . 热带生物学报, 2025, 16(): 1-11. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.20250015
[4]	郑雨, 程潇, 程科, 赵惠萍. 木薯RLK1候选互作蛋白筛选及其与BSK互作的酵母验证 . 热带生物学报, 2025, 16(): 1-10. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.20240187
[5]	杨雨, 胡欣欣, 丁世涛, 袁志能, 黄肖, 欧阳宇珺, 高新生. 21个品系橡胶树的叶片解剖特征研究 . 热带生物学报, 2024, 15(4): 373-381. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.20230137
[6]	聂雪纯, 李思鹏, 刘玉涵, 缪卫国, 李潇. 橡胶树HbLFG2蛋白对植物免疫防卫的调控机理 . 热带生物学报, 2023, 14(4): 380-388. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2023.04.005
[7]	刘少军, 蔡大鑫, 佟金鹤, 李伟光. 气象条件对中国橡胶树种植的影响 . 热带生物学报, 2022, 13(4): 376-381. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2022.04.008
[8]	贺竞锋, 刘先宝, 李博勋, 蔡吉苗, 冯艳丽, 黄贵修. 橡胶树不同种群炭疽菌对杀菌剂的敏感性 . 热带生物学报, 2022, 13(6): 582-588. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2022.06.007
[9]	童俊儒, 安锋, 谢贵水. 基于CROPWAT模型的橡胶树需水量 . 热带生物学报, 2022, 13(1): 48-56. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2022.01.008
[10]	祁栋灵, 吴志祥, 兰国玉, 孙瑞, 陈帮乾, 杨川, 陶忠良. 橡胶树寒害减灾技术研究 . 热带生物学报, 2022, 13(1): 19-26. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2022.01.004
[11]	林春花, 张宇, 刘文波, 李潇, 缪卫国. 我国巴西橡胶树炭疽病的研究进展 . 热带生物学报, 2021, 12(3): 393-402. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2021.03.018
[12]	贺延恒, 车海彦, 曹学仁. 橡胶树丛枝病的组织结构观察及分子发生机理 . 热带生物学报, 2020, 11(2): 223-230. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2020.02.013
[13]	巩笑笑, 闫冰玉, 谭玉荣, 王鹏, 李双江, 王艺, 周璐瑶, 刘进平. 橡胶树HbHMGS1启动子对光照、干旱及热击处理的表达响应 . 热带生物学报, 2019, 10(1): 52-59. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2019.01.009
[14]	彭昀, 肖宇明, 刘衍超, 李增平, 王萌, 梁晓宇, 张宇. 橡胶树枯萎病病原菌室内毒力测定 . 热带生物学报, 2019, 10(3): 272-275. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2019.03.012
[15]	胡进, 杨翠萍, 巩笑笑, 闫冰玉, 谭玉荣, 王丹, 高璇, 张恒, 刘进平. 橡胶树HbMVK启动子的克隆与缺失表达分析 . 热带生物学报, 2018, 9(1): 21-30. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2018.01.003
[16]	杨森, 张晓飞, 高新生, 李维国. 5个品系橡胶树叶片解剖结构及其抗旱性分析 . 热带生物学报, 2017, 8(3): 301-306. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2017.03.008
[17]	李艺坚, 刘进平. 橡胶树死皮病种类、病因及防治的研究进展 . 热带生物学报, 2015, 6(2): 223-228. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2015.02.017
[18]	李庆, 王军, 周珺, 林位夫. 影响橡胶树根系嫁接成活的因素 . 热带生物学报, 2014, 5(4): 320-325. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2014.04.003
[19]	樊兰艳, 贺春萍, 梁艳琼, 郑肖兰, 吴伟怀, 李锐, 郑服丛. 橡胶树枯草芽孢杆菌Czk1抑菌活性物质的理化性质 . 热带生物学报, 2013, 4(1): 36-44,55. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2013.01.007
[20]	李四有, 邱学俊. 丙环唑防治橡胶树红根病田间试验 . 热带生物学报, 2012, 3(4): 325-328. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2012.04.002

WeChat

点击查看大图

计量

文章访问数: 1
HTML全文浏览量: 0
PDF下载量: 0
被引次数: 0

巴西橡胶树胶乳酵母双杂交cDNA表达文库的构建及分析

doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2013.04.001

1. 海南大学农学院, 海南海口 570228;

2. 中国热带农业科学院热带生物技术研究所/农业部热带作物生物学与遗传资源利用重点实验室, 海南海口 571101

基金项目:

中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金资助项目(ITBB110205)

国家自然科学基金项目(31170634)

作者简介:
杨子平(1984-),男,湖南衡阳人,海南大学2012级在读博士研究生。研究方向:植物分子生物学.

通讯作者: 彭世清,E-mail:shqpeng@163.com

收稿日期: 2013-09-22

中图分类号: Q782

关键词:

酵母双杂交 /

摘要: 提取巴西橡胶树胶乳总RNA,并纯化mRNA。采用特异引物(oligo-dT)反转出第一链DNA,经LDPCR合成第二链DNA。将ds cDNA和经SmaⅠ线性化的pGADT7-Rec质粒共转化Y187酵母菌,构建酵母双杂交cDNA表达文库。结果表明,转化单菌落个数为2.8×10⁷;文库滴度为4.92×10⁷·mL^-1;插入片段大小主要分布于500～2 000 bp间;重组率为96%。实验数据表明该文库能满足后续的杂交筛选。

English Abstract

杨子平, 李辉亮, 郭冬, 彭世清. 巴西橡胶树胶乳酵母双杂交cDNA表达文库的构建及分析[J]. 热带生物学报, 2013, 4(4): 303-307. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2013.04.001

引用本文:

杨子平, 李辉亮, 郭冬, 彭世清. 巴西橡胶树胶乳酵母双杂交cDNA表达文库的构建及分析[J]. 热带生物学报, 2013, 4(4): 303-307. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2013.04.001

YANG Ziping, LI Huiliang, GUO Dong, PENG Shiqing. Construction and Analysis of Latex cDNA Library for A Yeast Two-hybrid Library[J]. Journal of Tropical Biology, 2013, 4(4): 303-307. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2013.04.001

Citation:

YANG Ziping, LI Huiliang, GUO Dong, PENG Shiqing. Construction and Analysis of Latex cDNA Library for A Yeast Two-hybrid Library[J]. Journal of Tropical Biology, 2013, 4(4): 303-307. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2013.04.001

全文HTML

/

下载: 全尺寸图片幻灯片

分享

用微信扫码二维码

分享至好友和朋友圈

返回

x 关闭永久关闭

《热带生物学报》编辑部参与2025年热区高校联盟年会