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女贞RAPD-PCR实验条件的优化

赵峰 刘国民 李娟玲 张其文 符伟 张恩华

赵峰, 刘国民, 李娟玲, 张其文, 符伟, 张恩华. 女贞RAPD-PCR实验条件的优化[J]. 热带生物学报(中英文), 2014, 5(4): 374-380. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2014.04.012
引用本文: 赵峰, 刘国民, 李娟玲, 张其文, 符伟, 张恩华. 女贞RAPD-PCR实验条件的优化[J]. 热带生物学报(中英文), 2014, 5(4): 374-380. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2014.04.012
ZHAO Feng, LIU Guomin, LI Juanling, ZHANG Qiwen, FU Wei, ZHANG Enhua. Optimization of the Experimental Conditions for RAPD-PCR of Ligustrum lucidum Ait.[J]. Journal of Tropical Biology, 2014, 5(4): 374-380. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2014.04.012
Citation: ZHAO Feng, LIU Guomin, LI Juanling, ZHANG Qiwen, FU Wei, ZHANG Enhua. Optimization of the Experimental Conditions for RAPD-PCR of Ligustrum lucidum Ait.[J]. Journal of Tropical Biology, 2014, 5(4): 374-380. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2014.04.012

女贞RAPD-PCR实验条件的优化

DOI: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2014.04.012
基金项目: 

国家自然科学基金资助项目(39860048)

海南省教育厅基金资助项目(Hjkj2012-51)

详细信息
    第一作者:

    赵峰(1981-),女,硕士,讲师.Email:928662418@qq.com

    通信作者:

    李娟玲(1972-),女,硕士,高级实验师.研究方向:植物种质资源学.Email:ljl0728@126.com

  • 中图分类号: S571.1

Optimization of the Experimental Conditions for RAPD-PCR of Ligustrum lucidum Ait.

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    出版历程
    • 收稿日期:  2014-10-08

    女贞RAPD-PCR实验条件的优化

    DOI: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2014.04.012
      基金项目:

      国家自然科学基金资助项目(39860048)

      海南省教育厅基金资助项目(Hjkj2012-51)

      作者简介:

      赵峰(1981-),女,硕士,讲师.Email:928662418@qq.com

      通讯作者: 李娟玲(1972-),女,硕士,高级实验师.研究方向:植物种质资源学.Email:ljl0728@126.com
    • 中图分类号: S571.1

    摘要: 采用单因素梯度试验对影响女贞(Ligustrum lucidum Ait.)RAPD扩增的若干重要影响因素(包括Mg Cl2、d NTPs、随机引物、Taq DNA聚合酶浓度、模板DNA用量,以及退火温度与循环次数等)进行了优化。优化后的女贞RAPD-PCR反应体系为:每25μL体积中含10×反应buffer 2.5μL,2.5 mmol·L-1Mg Cl23.0μL,0.2 mmol·L-1d NTPs 0.5μL,2.0 U Taq酶0.4μL,0.4μmol·L-1引物1.0μL,DNA模板60 ng。PCR扩增程序:在94℃条件下预变性4 min,然后依次在94℃条件下变性30 s,38℃条件下退火45 s,72℃条件下延伸2 min;进行40个循环,最后在72℃条件下延伸10 min,并于16℃条件下保存。以该优化的RAPD反应体系对木犀科女贞属植物不同居群间的女贞种质材料的扩增,均能获得丰富而清晰的条带,且重现性好。

    English Abstract

    赵峰, 刘国民, 李娟玲, 张其文, 符伟, 张恩华. 女贞RAPD-PCR实验条件的优化[J]. 热带生物学报(中英文), 2014, 5(4): 374-380. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2014.04.012
    引用本文: 赵峰, 刘国民, 李娟玲, 张其文, 符伟, 张恩华. 女贞RAPD-PCR实验条件的优化[J]. 热带生物学报(中英文), 2014, 5(4): 374-380. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2014.04.012
    ZHAO Feng, LIU Guomin, LI Juanling, ZHANG Qiwen, FU Wei, ZHANG Enhua. Optimization of the Experimental Conditions for RAPD-PCR of Ligustrum lucidum Ait.[J]. Journal of Tropical Biology, 2014, 5(4): 374-380. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2014.04.012
    Citation: ZHAO Feng, LIU Guomin, LI Juanling, ZHANG Qiwen, FU Wei, ZHANG Enhua. Optimization of the Experimental Conditions for RAPD-PCR of Ligustrum lucidum Ait.[J]. Journal of Tropical Biology, 2014, 5(4): 374-380. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2014.04.012

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