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巴西橡胶树胶胞炭疽病菌CgE6基因RNAi突变体的构建

何芬, 罗红丽

文章导航 > 热带生物学报（中英文） > 2014 > 5(3): 233-238

何芬, 罗红丽. 巴西橡胶树胶胞炭疽病菌CgE6基因RNAi突变体的构建[J]. 热带生物学报（中英文）, 2014, 5(3): 233-238. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2014.03.005

引用本文:

何芬, 罗红丽. 巴西橡胶树胶胞炭疽病菌CgE6基因RNAi突变体的构建[J]. 热带生物学报（中英文）, 2014, 5(3): 233-238. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2014.03.005

HE Fen, LUO Hongli. Construction and Expression Analysis of CgE6 RNAi Mutant in Colletotrichum gloeosporioides from Hevea brasiliensis[J]. Journal of Tropical Biology, 2014, 5(3): 233-238. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2014.03.005

Citation:

HE Fen, LUO Hongli. Construction and Expression Analysis of CgE6 RNAi Mutant in Colletotrichum gloeosporioides from Hevea brasiliensis[J]. Journal of Tropical Biology, 2014, 5(3): 233-238. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2014.03.005

巴西橡胶树胶胞炭疽病菌CgE6基因RNAi突变体的构建

DOI: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2014.03.005

何芬,
罗红丽^,

海南大学海南省热带作物资源可持续利用重点实验室, 海南海口 570228

基金项目:

国家自然科学基金项目(31360424)

2011“新世纪优秀人才支持计划”(NCET-11-0928)

第一作者:
何芬(1987-),女,海南大学农学院2011级硕士研究生.E-mail:373358007@qq.com

通信作者:
罗红丽(1973-),女,博士,研究员,从事植物与病原微生物互作的研究.E-mail:hlluo@live.com

中图分类号: S763.7

Construction and Expression Analysis of CgE6 RNAi Mutant in Colletotrichum gloeosporioides from Hevea brasiliensis

HE Fen,
LUO Hongli^,

Hainan Key Laboratory for Sustainable Utilization of Tropical Bioresources, Hainan University, Haikou 570228, China

摘要: 为了研究橡胶树胶孢炭疽病菌效应蛋白基因CgE6的功能,笔者利用RNAi技术原理,构建了可用于转化丝状真菌的RNAi双元重组载体p Silent-CgE6-FR,通过PEG介导法遗传转化橡胶树胶孢炭疽病菌原生质体,在抗性培养基上获得了CgE6的RNAi转化子并任意选取抗性转化子进行分子鉴定。结果表明,所检测的转化子基因组中都有抗性标记的整合;与野生型菌株相比,所检测的转化子中目标基因CgE6的表达均出现不同程度的降低,其中1,2,7号转化子的表达水平最低;本实验成功构建了有效的CgE6效应蛋白基因的RNAi突变体,为进一步研究该效应蛋白的功能奠定了基础。
- 橡胶树胶胞炭疽病菌 /
- CgE6 /
- RNAi突变体 /
- 分子鉴定
Abstract: Abstrat: RNA interference（ RNAi） technology is one of the important methods for studying gene function,but it is not widely used in filamentous fungi. The RNAi binary vector p Silent-CgE6-FR was constructed based on the principle of RNAi technology to investigate the function of effector gene CgE6 in Colletotrichum gloeosporioides from Hevea brasiliensis. Transformation was done by using the PEG mediated method,and CgE6 RNAi transformants were screened on culture medium with hygromycin. Seven transformants randomly selected were identified resistant at a molecular level. The results of PCR amplification for hygromycin gene were positive,and the semi-quantitative RT-PCR analysis demonstrated that the transformants had a lower expression of CgE6 but at different levels than those of the wild type strain,of which the transformants 2 and 7 showed a minimum expression of CgE6. All these data showed that CgE6 RNAi mutants were successfully constructed,which would help to further study the functions of CgE6.
- Colletotrichum gloeosporioides /
- CgE6 /
- RNAi mutant /
- molecular identification

[1]	符英洁, 白永霞, 王帅, 孙然锋. Waltherione A抗性突变体A1基础表型及潜在靶标基因筛选 . 热带生物学报（中英文）, 2026, 17(): 1-13. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.20260019
[2]	郑诗雅, 李加慧, 林晓丹. 海南岛热带雨林毛蠓亚属（双翅目：蠓科：毛蠓属）2新种及1海南新纪录种 . 热带生物学报（中英文）, 2026, 17(): 1-10. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.20250178
[3]	孟祥瑞, 李加慧, 林晓丹. 海南岛铗蠓属尤蠓亚属（双翅目：蠓科）一新种及一海南新纪录种 . 热带生物学报（中英文）, 2025, 16(4): 553-560. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.20240071
[4]	何泽华, 李加慧, 林晓丹. 基于DNA条形码的棕榈裸蠓雄虫的发现与描述 . 热带生物学报（中英文）, 2024, 15(1): 94-99. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.20230012
[5]	蔡波, 赵晨阳, 李芬, 陈施明, 贾静, 刘福秀, 吴少英. DNA条形码技术在快速鉴定石斛兰斑翅康瘿蚊（Contarinia maculipennis Felt）上的应用 . 热带生物学报（中英文）, 2024, 15(4): 493-498. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.20230114
[6]	蔡波, 温淑璇, 张坤, 裴佶, 万培弟, 刘福秀, 吴少英. 检疫性害虫带木蠹象Pissodes castaneus （DeGeer）的鉴定 . 热带生物学报（中英文）, 2024, 15(3): 332-336. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.20230115
[7]	黄晓欣, 谈嘉莉, 杨永星, 顾哲铭, 李雪珽, 雷晓凌. 耐热真菌HS1-1的生理特性和抗菌活性 . 热带生物学报（中英文）, 2023, 14(5): 552-559. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.20220047
[8]	周飒, 林洋, 祖海月, 王金花. 海南4个地区犬体表蜱种鉴定及其无形体携带情况 . 热带生物学报（中英文）, 2023, 14(2): 159-165. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2023.02.004
[9]	李旭扬, 陈舒苗, 于津鹏, 罗素兰, 长孙东亭. α6/α3β4烟碱型乙酰胆碱受体β4亚基双点突变体的制备及其功能研究 . 热带生物学报（中英文）, 2021, 12(4): 403-411. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2021.04.001
[10]	张璐, 朱晓鹏, 长孙东亭, 罗素兰. 烟碱型乙酰胆碱受体β4亚基点突变体的构建 . 热带生物学报（中英文）, 2019, 10(4): 307-313. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2019.04.001
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[12]	周康, 吴文碟, 宋希强, 周扬. 金线莲促生内生真菌的筛选与鉴定 . 热带生物学报（中英文）, 2018, 9(4): 440-444. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2018.04.012
[13]	苏美凤, 孙靖雨, 胡坚, 吴迪, 庙浩, 范咏梅. 普通大蓟马不同地理种群的分子鉴定及酶活测定 . 热带生物学报（中英文）, 2017, 8(3): 364-370. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2017.03.019
[14]	廖华兰, 黎秀琼, 李可, 李伯凌, 熊茜, 苏童, 李春霞, 陈银华, 罗丽娟. 农杆菌介导的木薯遗传转化体系的优化 . 热带生物学报（中英文）, 2016, 7(4): 427-434. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2016.04.004
[15]	汪倩, 何朝族, 罗红丽. 橡胶树胶孢炭疽病菌CgBASP2基因敲除突变体构建及其致病力分析 . 热带生物学报（中英文）, 2015, 6(1): 41-46. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2015.01.006
[16]	刘鑫鑫, 朱军, 黄惠琴, 刘敏, 邹潇潇, 鲍时翔. 海南2种马尾藻的分类鉴定 . 热带生物学报（中英文）, 2014, 5(4): 357-362,367. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2014.04.009
[17]	杨勤, 罗丽娟. 柱花草炭疽病菌的准确快速鉴定 . 热带生物学报（中英文）, 2013, 4(3): 220-224. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2013.03.006
[18]	邓晓东, 周玉娇, 费小雯. 4株小球藻缺陷培养条件的优化及藻株CE14的分子鉴定 . 热带生物学报（中英文）, 2012, 3(3): 216-221. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2012.03.001
[19]	陈青, 卢芙萍, 徐雪莲. 水稻叶色突变体研究进展 . 热带生物学报（中英文）, 2010, 1(3): 269-281. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2010.03.008
[20]	谢俊, 张旭一, 陈银华, 陈彩燕, 韦双双, 夏幽泉, 汤华. 香蕉枯萎病菌的分离鉴定与形态学研究 . 热带生物学报（中英文）, 2010, 1(4): 337-341. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2010.04.010

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巴西橡胶树胶胞炭疽病菌CgE6基因RNAi突变体的构建

DOI: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2014.03.005

何芬,
罗红丽^,

海南大学海南省热带作物资源可持续利用重点实验室, 海南海口 570228

基金项目:

国家自然科学基金项目(31360424)

2011“新世纪优秀人才支持计划”(NCET-11-0928)

作者简介:
何芬(1987-),女,海南大学农学院2011级硕士研究生.E-mail:373358007@qq.com

通讯作者: 罗红丽(1973-),女,博士,研究员,从事植物与病原微生物互作的研究.E-mail:hlluo@live.com

收稿日期: 2014-03-04

中图分类号: S763.7

关键词:

橡胶树胶胞炭疽病菌 /

RNAi突变体 /

摘要: 为了研究橡胶树胶孢炭疽病菌效应蛋白基因CgE6的功能,笔者利用RNAi技术原理,构建了可用于转化丝状真菌的RNAi双元重组载体p Silent-CgE6-FR,通过PEG介导法遗传转化橡胶树胶孢炭疽病菌原生质体,在抗性培养基上获得了CgE6的RNAi转化子并任意选取抗性转化子进行分子鉴定。结果表明,所检测的转化子基因组中都有抗性标记的整合;与野生型菌株相比,所检测的转化子中目标基因CgE6的表达均出现不同程度的降低,其中1,2,7号转化子的表达水平最低;本实验成功构建了有效的CgE6效应蛋白基因的RNAi突变体,为进一步研究该效应蛋白的功能奠定了基础。

English Abstract

何芬, 罗红丽. 巴西橡胶树胶胞炭疽病菌CgE6基因RNAi突变体的构建[J]. 热带生物学报（中英文）, 2014, 5(3): 233-238. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2014.03.005

引用本文:

何芬, 罗红丽. 巴西橡胶树胶胞炭疽病菌CgE6基因RNAi突变体的构建[J]. 热带生物学报（中英文）, 2014, 5(3): 233-238. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2014.03.005

HE Fen, LUO Hongli. Construction and Expression Analysis of CgE6 RNAi Mutant in Colletotrichum gloeosporioides from Hevea brasiliensis[J]. Journal of Tropical Biology, 2014, 5(3): 233-238. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2014.03.005

Citation:

HE Fen, LUO Hongli. Construction and Expression Analysis of CgE6 RNAi Mutant in Colletotrichum gloeosporioides from Hevea brasiliensis[J]. Journal of Tropical Biology, 2014, 5(3): 233-238. doi: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2014.03.005

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